Состав осп плиты: Особенности производства плит ОСБ и их технические параметры

Содержание

Что такое OSB? Области применения, плюсы и минусы ОСБ

Строительные компании, а также производители мебели часто указывают в качестве используемых материалов OSB плиты или просто OSB. Эта аббревиатура обычно ничего не говорит простому потребителю. Итак, OSB – что это такое, для чего используется, какие имеет достоинства или недостатки?

Название OSB расшифровывается просто – это начальные буквы слов orient strand board, которые переводятся как ориентировано-стружечная плита. Также плиты могут называть ОСБ панелями, осп листами или просто ОСБ или ОСП.

Плиты производятся из плоских древесных стружек или щепы. Для производства OSB плит больше всего подходит сырье из хвойных пород, но также используют и осину, тополь и т. д. В отличие от прочих стружечных плит (ДСП, к примеру), в ОСП щепа укладывается в заданном направлении. Именно поэтому такие стружечные плиты называются ориентированными. Поскольку ОСБ плиты состоят из нескольких (обычно из трех) слоев, направление стружки в слоях чередуется, благодаря чему эти плиты более прочные.

Процесс соединения слоев в листе OSB

Для соединения щепы между собой используются смолы, состоящие из карбамида, меламина, восков и прочих веществ. Содержание смол в составе – менее 10%, что делает ОСБ панели условно-натуральным материалом. Панели могут ламинироваться или лакироваться для дополнительной защиты.

OSB плиты нашли широкое применение в домостроение. В частности, они являются частью СИП панелей, материала, использующегося для строительства домов из СИП панелей.

ОСБ плита – это листы размером примерно 2,5 на 1, 25 м. Толщина плит бывает разной, она варьируется от 6 до 38 мм. Для удобства монтажа плиты могут иметь обработанные торцы по принципу «паз-гребень».

Виды OSB

Существует 4 вида OSB, все они делятся по прочности и по водостойкости:

Вид: Влагостойкость Прочность
OSB-1 низкая низкая
OSB-2 низкая высокая
OSB-3 высокая высокая
OSB-4 высокая сверхвысокая

Плюсы и минусы ОСБ

К преимуществам ориентировано-стружечных панелей можно отнести следующие свойства:

  • стоимость;
  • прочность;
  • влагостойкость;
  • простота обработки;
  • отсутствие расслоений;
  • отличная удерживающая способность – крепежи в ОСП держатся на порядок лучше, чем в ДСП.

Что с безопасностью? Существуют заблуждения о вредности OSB плит для здоровья человека. Кто-то говорит, что это токсичный материал, что его нельзя использовать в помещениях, что OSB выделяет формальдегид и пр. Подавляющее большинство таких заблуждений полный вымысел, не имеющий ничего общего с истинным положением дел. Во-первых, все панели проходят сертификацию. Разработан международный стандарт Е1 для материалов, используемых в домостроении. Плиты OSB, имеющие соответствующую маркировку, безопасны для человека. Во-вторых, обычная грунтовка и окраска полностью блокирует выделение каких-либо веществ из плит. Таким образом, они максимально безопасны для здоровья и нет никаких препятствий для использования их в помещении.

Существуют совершенно безопасные OSB плиты. Связующие вещества, использующиеся при производстве плит EUROSTRAND® OSB 3 E0 фирмы Egger вообще не содержат формальдегида. Связующим элементом выступает не фенолформальдегидная смола, а парафино-восковая эмульсия и полиуретановая смола.

Процесс укладки OSB щепыОборудование для производства OSB

Сравнение OSB и фанеры

OSB плиты можно сравнить с другими материалами и прежде всего с фанерой. По своим качествам они сходны, но если стоит выбор, фанера или ОСБ, то стоит обратить внимание на такие факты:

  • для изготовления ОСБ используется стружка быстрорастущих пород, для фанеры нужно более «благородное» сырье – в результате этого стоимость ОСБ ниже за счет цены на сырье;
  • OSB плиты не расслаиваются;
  • у ОСБ более однородная структура и на срезе предел прочности ОСБ выше, чем у фанеры;
  • прочность фанеры и OSB примерно одинакова, но у ОСБ прочностные характеристики не зависят от влажности;
  • ОСБ листы можно изготавливать любых размеров, процесс изготовления легко настраивать под определенные нужды;
  • плиты OSB легко обрабатываются любыми инструментами;
  • по соотношению веса и прочности ОСБ плиты выгоднее, чем фанера.

Итак, OSB это легкий и прочный строительный материал, превосходящий по многим параметрам таких именитых конкурентов, как фанера. При этом стоимость OSB ниже, что делает этот материал наиболее перспективным на рынке.

вред для здоровья человека — миф или правда?

Вредны ли ОСП-плиты для здоровья?

ОСП-плиты признаны одним из самых популярных и распространенных строительных материалов. Широкий спектр применения, легкость монтажа, удобство работы и невысокая цена объясняют их востребованность на рынке.

Несмотря на все положительные характеристики материала, многие перед приобретением задумываются о вреде ОСП-плит для здоровья. В первую очередь вопрос возникает из-за технологии производства. ОСП-плита состоит из трех слоев стружки, которые прессуются под высоким давлением и температурой. В качестве связующих компонентов используются формальдегидные смолы, влияние которых на организм человека нельзя назвать полезным.

Древесная стружка, которая является основой при изготовлении плит, совершенно безопасна для человека и не токсична. Вред человеку могут принести только вещества, которые используются для пропитки плит и для склеивания стружки. В зависимости от используемых веществ, выделяют несколько сортов ОСП-плиты. Их влияние на человека может быть совершенно разным.

Стандарты строительных материалов

Большинство строительных материалов, в том числе и ОСП-плиты, в обязательном порядке проходят санитарно-гигиеническую экспертизу, по итогам которой на каждую партию товара выдается сертификат. На его основании можно сделать вывод, насколько вредна данная продукция для потребителя.

ОСП-плиты, продаваемые в России, маркируют согласно европейскому стандарту DIN EN120, то есть квалифицируются по классам выделения формальдегида и других токсичных веществ. По данному стандарту ОСП-плиты делят на 4 класса токсичности, по содержанию вредных веществ на 100 г сухого вещества:

  • Е0 — до 6,5 мг;
  • Е1 — до 10 мг;
  • Е2 — 10–20 мг;
  • Е3 — 20–30 мг.

Плиты, относящиеся по стандарту к классам Е0 и Е1, рекомендуется использовать для внутренней отделки помещений. Доказано, что вред от таких ОСП-плит минимален, а преимущества бесспорны. Плиты Е2 и Е3 желательно использовать только при наружных работах.

При выборе ОСП, помимо сопровождающих документов, обратите внимание на упаковку. Крупные производители наносят дополнительную информацию на упаковку и снабжают ее листом-вкладышем, на котором отражается вся информация о характеристиках материала. Сами плиты не должны иметь запаха формалина и дешевого пластика.

Доверяйте проверенным продавцам

Таким образом, решить, вреден ли состав ОСП-плит для здоровья, можно основываясь на прилагаемых к каждой партии документах. На строительном рынке сегодня можно встретить ОСП-плиты, совершенно безопасные для применения, так и плиты, использовать которые не стоит при внутренней отделке жилых помещений.

Крупные европейские и российские производители стружечных плит очень внимательно относятся к экологической чистоте выпускаемых материалов. Зачастую, помимо обязательной сертификации, они проходят дополнительно различные добровольные экспертизы, подтверждающие качество и безопасность продукции.

Чтобы приобрести плиты-ОСП высокого качества, которые не причинят ни малейшего вреда здоровью, выбирайте проверенные компании по продаже строительных материалов и внимательно изучайте документы на реализуемый товар.

Плиты OSB. Преимущества, недостатки, вред здоровью

Ориентированно-стружечные плиты OSB (от оригинального английского названия Oriented strand board, OSB) – это популярный и востребованный строительный материал, уверенно потеснивший на рынке фанеру, древесно-стружечные плиты и прочие похожие материалы. Какие его основные преимущества? Не нанесет ли применение вреда здоровью? Попробуем разобраться, насколько экологичный этот материал.

Из чего и как сделана OSB-плита?

Состав OSB-плит

 ОСБ плиты на 90-95% состоят из дерева. На изготовление идет крупная стружка и  тонко струганная щепа в основном древесины хвойных пород. Оставшаяся часть - это клей на основе воска и синтетических смол (меламиноформальдегидных, карбамидоформальдегидных или фенолформальдегидных.

Как изготавливают OSB-плиты?

Получают плиты путем прессования стружечного мата при высокой температуре. Стружка в слоях плиты имеет различную ориентацию: в наружных - продольную, во внутренних – поперечную. Такая ориентация обеспечивает высокую прочность плиты во всех направлениях.

Преимущества и недостатки OSB-плит

Плюсы OSB широко известны:

  • Высокая прочность материала на сжатие, изгиб и отрыв.
  • Механическая устойчивость к ударам и царапинам.
  • Относительно небольшой вес.
  • Шумо- и термоизоляция, что обусловлено свойствами древесных стружек.
  • Простота в обработке и монтаже.
  • Не портится насекомыми.

Есть и минусы, как и любого другого материала:

  • Разбухает при прямом контакте с водой.
  • Горючий, соответственно пожароопасный материал.     
  • Высокая цена.

Что интересно, продавцы ОСБ плит к преимуществам относят их экологичность, убеждая в полной безвредности материала.  Потенциальные покупатели самым большим недостатком считают вред этих плит для здоровья человека. Так, где же истина?

Экологичность OSB-плит

В чем вред OSB-плит для здоровья?  И есть ли он?

Смолы, входящие в состав плит, имеют высокую токсичность. Они могут выделять  формальдегид, метанол, а некоторые еще и фенол. Прессование происходит при высокой температуре, в результате деполимеризации смолы значительная часть этих токсичных веществ вступает в химические реакции, а также испаряется прямо в производственных цехах.  В плите остаются только незначительные количества непрореагировавших вредных веществ.  Они некоторое время еще будут выделяться в воздух из готовой плиты.

Почему же стружечные плиты считаются экологичными и пригодными к использованию в жилых помещениях? Все дело в том, что:

  • Они состоят в основном из экологически чистого материала – древесной стружки. Клеящего состава в листах OSB совсем немного – 5% у ведущих производителей, до 7-9% у менее известных. Это в 2-3 раза меньше, чем у ДСП, а ДСП-плиты у нас широко используются для производства мебели. Эмиссия (выделение в воздух) вредных веществ тоже, соответственно, меньше. К тому же, она постепенно уменьшается со временем.
  • OSB-плиты используют в основном не для отделки, а для строительства – это СИП-панели, черновой пол, межкомнатные перегородки, подложка под крышу и т.п. Это означает, что поверх них будут уложены другие материалы – гипсокартон, ламинат, линолеум или просто нанесены слои краски или лака. Все вредные вещества, которые еще остались в материале просто не смогут просочиться в воздух жилых помещений.

Более важными вопросами будут другие:
Из чего сделан ламинат? Вреден ли он?
Гипсокартон. Разновидности и применение

Поэтому можно сделать вывод – OSB плиты это вполне безопасный, надежный и качественный строительный материал. И не удивительно, что с каждым годом его применение расширяется.

Как выбрать качественные OSB-плиты?

OSB и некоторые другие композитные материалы принято маркировать по европейскому стандарту DIN EN120, который определяет класс эмиссии формальдегида и некоторых других токсичных веществ:

  • Е3 – до 30 мг на 100 г сухого вещества;
  • Е2 – 10-20 мг;
  • Е1 – до 10 мг;
  • Е0 – до 6,5 мг.

Плиты класса Е0-Е1 выпускают такие гиганты как Glunz (Германия), Norbord (Канада), Egger (Австрия), они считаются полностью безопасными, поэтому они рекомендованы к применению внутри жилых помещений с последующей облицовкой (включая детские комнаты, больницы).

Плиты с маркировкой Е2 можно использовать только для наружных работ, включая облицовку нежилых чердаков, несущие конструкции во времянках и т.п. Класс Е3 сейчас практически снят с производства.

Серьезные производители, как правило, охотно предоставляют свою продукцию для дополнительных добровольных проверок. Так, австрийская компания Egger периодически получает сертификат «Голубой ангел», подтверждающий экологичность ее товаров.

Если вы собираетесь покупать ОСБ, определить вред продукции можно несколькими способами:

  • Обратите внимание на запах листов. Токсичные испарения дают характерный резкий «аромат» формалина или дешевого пластика.
  • По возможности осмотрите упаковку. Крупные заводы наносят маркировку на нее и дополнительно комплектуют вкладышами с основной информацией.
  • Не покупайте стройматериалы сорта «точно такое, но дешевле». Это наверняка подделка.

Не экономьте на своем здоровье – чтобы минимизировать вред выбирайте продукцию с маркировкой Е0-Е1 от проверенных производителей.

ОСБ плита. Классы и характеристики. Плюсы и минусы. Применение

Ориентированно-стружечная плита, или ОСБ плита – это многослойный листовой строительный материал, полученный в результате переработки древесных отходов. Для ее производства применяется древесная стружка в виде тонких щепок, которые склеиваются между собой с помощью синтетических смол, с включением в состав борной кислоты и воска. Прочностные характеристики материала достигаются благодаря разной ориентации щепок. Наружные укладываются продольно, а стружка из внутренних слоев – поперечно.

Классы OSB

ОСБ плита классифицируется на 4 вида. Они отличаются по техническим характеристикам и эксплуатационным качествам. Каждый класс OSB предназначен для разного направления использования:

  1. OSB1 – данный материал имеет самую низкую плотность. Как следствие он плохо переносит контакт с влажной средой. Такие изделия часто используются в мебельной промышленности в качестве чернового материала для создания каркасов диванов, которые в дальнейшем закрываются обивкой.
  2. OSB2 – это более плотные плиты, однако они тоже плохо переносят контакт с влагой. Такие изделия подходят для создания различных конструкций и обшивки в помещениях с умеренным уровнем сырости.
  3. OSB3 – это самый распространенный материал. Он имеет повышенные показатели устойчивости к механическому воздействию, а также переносит высокую влажность. Несмотря на множество положительных свойств, такие плиты не рассчитаны на постоянное нахождение в воде. При продолжительной сырости в окружающей среде они могут деформироваться. OSB3 плита предназначена для использования при выполнении наружных работ. Для повышения ее защиты возможно покрытие краской или специальной пропиткой.
  4. OSB4 – самая прочная ориентированно-стружечная плита. Она может использоваться снаружи помещений, поскольку нормально переносит высокую влажность. Несмотря на очень хорошие показатели износостойкости, прочности и устойчивости к сырости OSB4 пользуется малым спросом. Это обусловлено дороговизной. Ее цена в 2 раза выше, чем у OSB3.
Вес, толщина, размер, свойства материала

Одним из самых важных показателей устойчивости OSB плит является их толщина. Чем она выше, тем больше в ней слоев с разным расположением древесных щепок. Толщина материала колеблется в пределах от 8 до 26 мм. Стандартный размер плит 2500х1250 мм.

Назначение материала определяется в первую очередь его толщиной, а также классом. К примеру, самые тонкие листы от 8 до 16 мм используются при выполнении обшивки. Они подходят для создания основания для мягкой кровли. Ими можно обшивать стены. Для деревянных полов применяют листы толщиной 16-20 мм. Самый толстый материал используется в тех случаях, когда ожидается нагрузка в сотни килограмм. ОСБ плита максимальной толщины часто применяется для обшивки полов в мастерских.

OSB в 2,5 раза крепче, чем ДСП. По устойчивости к механическому воздействию ее можно сравнить с фанерой из хвойной древесины. Коэффициент набухания OSB около 10%. Благодаря этому при нахождении в воде плита сохраняет свои прочностные показатели на протяжении суток. При ее изготовлении используется тонкая щепа уложенная очень плотно. Благодаря этому материал лишен сучков и пустот. Он не склонен к расслоению, поскольку содержит большое количество связующих смол. OSB на 25% лучше удерживает закрученный в нее крепеж, чем фанера из хвои или ДСП. Материал не интересует насекомых.

Преимущества материала
ОСБ плита пользуется очень высоким спросом в строительной сфере и мебельном производстве, поскольку наделена множеством положительных качеств:
  • Высокая прочность.
  • Хорошая упругость.
  • Однородная структура без дефектов.
  • Сохранение стабильности при кратковременном увеличении влажности.
  • Легкая обработка.
  • Хорошая тепло и звукоизоляция.
  • Устойчивость к химическому воздействию.
  • Стойкость к плесени и грибку.

OSB плита очень прочный материал. Предел ее устойчивости при статическом изгибе составляет 22 МПа. К примеру, у ДСП этот показатель составляет всего 14 МПа. Она имеет модуль упругости при статическом изгибе 3500 МПа (у ДСП 1800 МПа). OSB может выдерживать нагрузку в несколько сотен килограмм, что позволяет ее использовать при сборке ответственных конструкций, на которые будет оказываться серьезное давление. OSB сохраняет свою целостность при любом воздействии. Плита останется целой при растяжении и воздействии на излом.

Материал отличается легкостью и упругостью. Благодаря этому он может применяться для выполнения обшивки изогнутых конструкций. Предварительно разогретая плита может закругляться на большой радиус. Этим можно воспользоваться при необходимости обшивки мансардных помещений.

Плита имеет однородную структуру. Вложенная в ней щепа очень тонкая, благодаря чему поверхность плиты не имеет существенных выступов. Маленькие ступеньки между стружкой закрываются смолой. Структура однородности обеспечивает прочность материала при сгибании. В отличие от фанеры он не начнет расслаиваться, поскольку состоит из маленькой щепы, а не больших листов шпона.

Материал хорошо обрабатывается. Его раскрой осуществляется ручной ножовкой, электролобзиком, циркулярной пилой. Он легко сверлится с использованием обыкновенных сверл по дереву и коронок. Для крепления плит применяются саморезы. Допускается их вкручивание без предварительного сверления листа. Это обеспечивает высокую скорость выполнения монтажных работ.

OSB имеет хорошие показатели звуко и теплоизоляцией. ОСБ плита отлично подходит для строительства каркасных сооружений. Ее часто применяют при изготовлении СИП панелей. OSB используется при обшивке мансардных помещений, поскольку хорошо переносит влажность в сравнении с другими материалами. При этом она способствует сохранению тепла.

Благодаря специальной пропитке, а также высокой концентрации смол, которые используются для закрепления щепы при производстве OSB, она совершенно неподвержена поражению плесенью и грибками. Она имеет большой эксплуатационный ресурс.

Недостатки материала
ОСБ плита, несмотря на множество достоинств, не является абсолютно идеальным строительным материалом. Она наделена существенными недостатками:
  • Неприятный запах.
  • Испаряет формальдегиды.
  • Имеет низкую паропроницаемость.

Используемые связующие вещества при производстве OSB плит имеют характерный запах, который очень долго выветривается. Выполняя обшивку стен или укладывая листы на пол нужно быть готовыми к тому, что характерный запах будет сохраняться достаточно долго. У хорошего материала он выветривается за несколько недель, а у более дешевого практически не проходит даже через полгода. Зачастую проблема неприятного запаха в помещении связана с тем, что при покупке была выбрана OSB для наружных работ. В ней в качестве связующего вещества используются смолы с другими химическим составом. Плиты для уличного применения имеют гораздо более устойчивый запах. При совершении покупки нужно обязательно интересоваться о назначение материала и использовать его правильно. ОСБ для наружных работ категорически нельзя применять для внутренней обшивки.

Главным недостатком OSB является выброс испарений формальдегида. Это общая проблема для всех листовых материалов, получаемых в результате переработки отходов древесины. Стоит отметить, что ОСБ выделяет меньше формальдегида, чем ДСП, поскольку в плите используется не так много связующих веществ. Применяя OSB для выполнения внутренних работ нужно требовать у продавца сертификат соответствия, чтобы проверить соблюдение производителем экологических требований. Сертифицированная продукция имеет низкую эмиссию формальдегида и прочих токсических смол.

Также к недостаткам можно отнести низкую паропроницаемость плит. Она может быть важной при настиле полов. В том случае если OSB используется для обшивки мансарды, то это не столь существенно. Дело в том, что кровельный пирог имеет в своем составе специальные останавливающие влагу мембраны, которые все равно предотвращают проникновение пара

Область использования
ОСБ плита имеет очень широкую сферу применения. Ее используют при выполнении:
  • Обшивки стен.
  • Создания сплошной обрешетки кровли.
  • Укладки черновых полов.
  • Производства СИП панелей.
  • Сборки съемной опалубки для заливки бетона.

При обшивке стен применяется тонкая плита. Она закрепляется на ранее созданный каркас из деревянной рейки или металлического профиля. Листы прикручиваются с помощью саморезов. Чаще всего материал используется при строительстве каркасных домов. Также из него делают межкомнатные перегородки. Его применение позволяет облегчить вес здания и ускорить строительство.

Очень часто OSB применяется при создании обрешетки кровли. На нее прибивают мягкие кровельные материалы, такие как гибкая черепица. Также на OSB можно прикрутить шифер. ОСБ плита входит в состав СИП панелей. Практически все сэндвич-панели изготавливаются на ее основе. Материал отлично подходит для создания черновых полов. Она закрепляется прямо к лагам, после чего сверху укладывается ламинат, линолеум или керамическая плитка.

Особой популярностью пользуется ламинированная OSB плита, которая применяется для сборки опалубки при заливке бетона. Благодаря ламинированному слою, плита может использоваться многократно. К ней не прилипает бетон, поэтому не требуется подкладка полиэтиленовой пленки. Для сборки опалубки используется толстая плита сечением от 16 мм и выше.

Похожие темы:

Насколько ОСБ токсичный материал - DAKO-GROUP

Как известно, спрос рождает предложение. А чем популярнее и востребованнее становятся осб плиты, тем больше толков появляется вокруг этого стройматериала. Одним из самых твердых убеждений является то, что в состав осб плит входит формальдегид, что делает осб плиты токсичными. 

В этой статье мы подробно опишем материалы, которые используются для производства этого стройматериала, что поможет вам самим убедиться в уровне вреда от плит осб. Для начала разберемся, что же такое, эти осб плиты. 

Ориентированно-стружечные плиты (ОСП, OSB или ОСБ) это стройматериал, состоящий из древесной стружки, уложенной слоями в определенном направлении. Такое строение плит позволяет обладать высокой прочностью, а дополнительные компоненты, входящие в состав материала, придают плитам осб влагостойкость и устойчивость к температурным перепадам. 

Основные материалы для производства ОСБ плит

Самым главным компонентом для изготовления плит является водоотталкивающий клей. В плитах высокого качества он составляет всего до 10% от общего состава. В составе такого клея, как правило, находятся синтетические смолы. Они могут быть фенолформальдегидные, меламиноформальдегидные или карбамидоформальдегидные. 

Токсичность осб плит зависит от процентного содержания этих веществ в клее. Львиная доля формальдегида испаряется уже в процессе производства плит. Происходит это в момент прессования плит под воздействием температуры в 200°С. Еще часть этого вещества испаряется в течение полугода с момента производства.

Следует учитывать тот факт, что в итоге, формальдегид в осб содержится в том же количестве, в каком присутствует в натуральной древесине. Фабрики по производству плит осб высокого качества используют полимерные МДИ смолы. Такие смолы изготавливают на основе метилендифенилдиизоцианата. 

Этот изомер является наименее токсичным соединением. Его широко используют в монтажных пенах, для производства СИП-панелей, в изоляции и холодильных установках. Все это окружает нас ежедневно, и никак не влияет на здоровье. Производители, используя клей на основе полимерных МДИ смол маркируют плиты ОСБ пометкой ЭКО. 

EN 300 – международный стандарт качественных плит

Производство любой продукции обязательно органами, контролирующими качество и соответствие определенным нормам. Сегодня у каждого товара, который отвечает этим нормам, присутствует маркировка ДСТУ и ГОСТ (Государственный стандарт). Так как применение осб плит распространяется по всему миру, и производство осуществляется во многих странах, знаком качества является соответствие стандарту по производству осб плит EN 300. 

 Рассмотрим этот стандарт на примере плиты осб 3. Нормы для осб 3: 

EN 300 — type OSB 3; EN 13501-1: class D-s1, d0; EN 13986:2004+A1:2015

КЛАСС ЭМИССИИ: E1 (EN ISO 12460-5)

Нас интересует класс эмиссии, который показывает допустимое содержание свободного формальдегида в 100 г сухой плите осб. Он обозначается буквой E и цифрой от 0 до 2. Чем ниже эта цифра – тем безопаснее материал для здоровья человека. 

В случае с осб 3, согласно стандарту производства, плиты соответствуют классу эмиссии Е1. И согласно ДСТУ EN 300-2008, значение перфорации равно до 8 мг/100 г сухой плиты. То есть в 100 г сухой осб плиты допустимо содержание не более 8 г формальдегида. Для примера, в лаке для ногтей содержится не менее 5% формальдегида, в шампуне не менее 0,1%, в креме для лица до 5% и т.д.

 А значение стойкого состояния эмиссии указывает на выделение в воздух не более 0,124 мг/м³ свободного формальдегида. К примеру, детская мебель соответствует классу эмиссии Е1. Все эти данные указывают на то, вред осб плит достаточно преувеличен. А формальдегид окружает нас каждый день в гораздо большем количестве, чем многие думают.

Чтобы убедиться в экологичности плит осб, на предприятиях по их изготовлению используют мерительные приборы. С помощью таких приборов провели детальное исследование СИП-панелей, и пришли к выводам, что содержание формальдегида 0,1 миллионной доли.

Что касается норме EN 13501-1: class D-s1, то она указывает на уровень пожаробезопасности строительного и отделочного материала. Согласно этой норме, осб 3 относится к древесным материалам, и обозначается буквой D, а s1 указывает на то, что элемент конструкции может выделять очень ограниченное количество горючих газов.

Причины слухов о токсичности ОСБ плит

Мы ни в коем случае не исключаем, что производится опасный осб. Такую продукцию выпускают предприятия, которые не соблюдают стандарты качества. Связующим веществом в плитах таких производителей является дешевый клей на основе опасных полимерных соединений. 

Как правило, такие плиты не маркируются и имеют ярко выраженный неприятный запах. Продавцы некачественных плит осб не могут предоставить сертификаты, так как ни о каких лабораторных исследованиях плит кустарного производства речь не идет. А в погоне за экономией, люди получают действительно токсичные стройматериалы.  

Компании же с мировым именем ежегодно вкладывают значительные финансы в экологичность и стандартизацию фабрик. Это позволяет им быть лидерами рынка и эталоном качества. Об этом громче любых слов говорит статистика. На сегодняшний день наиболее широкое применение осб плит по-прежнему остается в Северной Америке – 30% рынка древесных материалов. 

В Европе за последние 2 года уровень потребления осб плит вырос на 10%, до 2 миллионов кубометров в год. Как в Европе, так и в Америке модно экологически чистые материалы. Контроль качества продукция любого предприятия проходит не только во время производства. 

Существует множество инстанций, которые могут провести внезапную проверку на месте строительства. Любое отклонение от нормы влечет за собой серьезные штрафы и потерю лицензии. Ни один уважающий себя застройщик не станет рисковать своей лицензией ради экономии на стройматериалах. 

С ростом популярности плит осб, этот стройматериал встретит еще немало противоречивых мифов. Через этот этап проходит все новое и малоизученное. И прежде, чем покупать осб плиты, о которых вы что-то слышали или что-то знает, лучше проконсультируйтесь у профессионалов. 

На основании этой информации и документации, которую вам может предоставить только официальный дилер, вы можете убедиться в том, что применение осб плит от проверенного производителя никоим образом не навредит вам и вашим близким. Компания DAKO-GROUP готова помочь вам в выборе и доставке необходимого количества осб плит высокого качества.

Легкой вам стройки!

Чем обработать осб плиту от влаги и нужно ли это?

Ориентированно-стружечная плита (ОСП), находящаяся при эксплуатации внутри сухого помещения, не нуждается в какой-либо дополнительной защите от влаги. В худших условиях оказывается наружная обшивка дома из этой плиты. Со временем она темнеет не только от дождей, но и от солнечного ультрафиолета. Конечно, можно закрыть плиты сайдингом или блокхаусом, но это сопряжено с большими затратами. Чем обработать ОСП (OSB) плиту от влаги – вопрос непростой. Постараемся на него ответить.

Нужна ли дополнительная обработка?

Влагоустойчивость ориентированно-стружечных плит характеризуется величиной набухания по толщине в течение суток. По этому параметру cогласно американскому стандарту PS 2, европейскому EN-300 и российскому ГОСТ 10632-89 плиты разделяются на 4 типа (смотри таблицу).

Величина набухания по толщине за 24 ч, %
OSB-125
OSB-220
OSB-315
OSB-412

Напомним, что для наружной обшивки строения допускается использование только плит ОСП-3 и ОСП-4.

Если построенное сооружение еще как-то будет отделываться, то при строительстве плиты ОСБ лежат на стройплощадке в пачках. Даже после одного дождя несколько верхних листов разбухают чуть ли не в полтора раза. Такими они останутся и после высыхания. Остальные листы разбухают по торцам. Кстати, у североамериканских изделий торцы во избежание этого окрашены пропиткой кроваво-красного цвета.

Среди некоторых строителей бытует мнение, что ОСБ плиты не нуждаются в дополнительной обработке, поскольку и так пропитаны смолами, вощены, покрыты лаком. Опыт показывает, что через 2-3 года их внешний вид теряет первоначальную свежесть, они темнеют, кое-где выпучиваются отдельные щепки, стыки неряшливо выступают.

Поэтому дополнительная гидрофобная обработка не будет лишней, особенно если это – фасад жилого дома без какой-либо облицовки. Рассмотрим, чем обработать ОСП плиту от влаги.

1. Прозрачные пропитки

Наиболее дешевый вариант обработки – водоотталкивающие бесцветные пропитки. Специальных растворов для ОСП нет. Можно использовать любые средства для дерева, за исключением приготовленных на водной основе. Примеры таких составов:

  • Антисептик-пропитка для дерева Elcon на силиконовой основе. Предназначен для долговременной защиты деревянных конструкций от атмосферных воздействий, гниения, плесени. Область применения: для внутренних и наружных работ. Образует водоотталкивающую пленку, нетоксичен, позволяет дереву «дышать».
  • Инновационный отечественный гидрофобизирующий состав НЕОГАРД-Дерево-40 на кремнийорганических олигомерах. Предназначен для придания водоотталкивающих свойств изделиям из дерева и материалов на его основе: фанеры, ДСП, ДВП. Водопоглощение для ДСП уменьшается в 15 – 25 раз. Очевидно, что он подходит и для ОСП. Не изменяет естественный цвет материала, защитные свойства сохраняются не менее 5 лет.

2. Покрытие лаком

Наиболее подходит для защиты дерева (и ОСБ) от влаги так называемый яхтный лак на уретано-алкидной или алкидно-уретановой основе. Некоторые из популярных брендов:

  • Тиккурила UNIKA SUPER (Финляндия). Эта марка лидирует по устойчивости к воздействиям внешней среды, невосприимчивости к ультрафиолетовому излучению и перепадам температуры.
  • Marshall protex (Турция). Создает пластичную поверхностную пленку.
  • Marshall Protex Yat Vernik. Обладает повышенной износо- и влагостойкостью.
  • PARADE (Россия). Сохраняет свежесть в течение длительного времени.
  • Belinka Yacht (Россия). Обладает грязе- и водоотталкивающими свойствами, подчеркивает фактуру древесных материалов.
  • Лак-антисептик для дерева «Древолак» на акриловой основе с добавлением воска (Россия). Наряду с антисептическим и антибактериальным действием успешно защищает древесину от влаги.

3. Окрашивание

Поскольку ОСП – это продукт переработки дерева, то лакокрасочные материалы (ЛКМ) для них могут использоваться одни и те же:

  • Масляные краски. В связи с наличием в составе ОСП полимерных смол, краски на основе олифы не всегда хорошо ложатся на окрашиваемую поверхность. Для лучшей адгезии к основанию рекомендуется перед окраской производить двукратное грунтование с промежуточной шпаклевкой. Несмотря на это, ЛКМ на основе масла под воздействием ультрафиолета, перепадов температур и атмосферных осадков склонны к выцветанию, растрескиванию, вплоть до отслаивания. Можно порекомендовать краску на основе природного и модифицированного масла PINOTEX WOOD OIL SPRAY, которая неплохо сопротивляется воздействию внешних факторов.
  • Алкидные краски лучше соответствуют древесно-стружечным плитам, поскольку в их состав входит алкидная смола, как продукт химического взаимодействия природных масел с кислотами. Адгезия их выше по сравнению с масляными ЛКМ, сохнут быстрее и успешнее противостоят атмосферным воздействиям.
  • Акриловые составы, будучи недорогими и долговечными в эксплуатации, отличаются оптимальным соотношением качеств и наиболее востребованы для окраски дерева. К тому же выпускаются в большом цветовом ассортименте.

Внимание: предварительно обработайте небольшую поверхность в незаметном месте, чтобы убедиться в том, что под воздействием водной акриловой суспензии материал не разбухнет.

В заключение можно сказать, что на вопрос: чем обработать ОСП (OSB) плиту от влаги, однозначно ответить трудно. Во-первых: это зависит от того, хотите вы подчеркнуть фактуру плиты прозрачным раствором или, наоборот, – нанести кроющее (непрозрачное) покрытие. Во-вторых: – от финансовых возможностей и эстетических представлений застройщика.

где используются? Применение ОСП плит

ОСП-плита – материал, о котором слышали многие. Но далеко не все знают, что он собой представляет. В источниках и прайсах можно встретить разные написания названия: ОСБ, OSВ просто «стружечная плита». Любое из этих названий по сути будет верным. Итак, что такое ОСП-плита и где применяется этот материал?

Ориентированно-стружечные плиты: конструктив и разновидности

Изготавливаются такие плиты по технологии, похожей на технологию производства ДСП. Да и внешне ОСБ-плиты почти неотличимы от древесно-стружечных. Однако, в отличие от ДСП, древесное сырье, из которого изготавливается плита, укладывается в определенном направлении. Именно поэтому в названии плит этой категории появилось слово «ориентированная».

Оптимально для изготовления ОСП подходят стружка и щепы хвойных пород деревьев. Однако допустимо использовать осину, тополь и отходы древесины других пород.

Теперь – о том, как делают ОСП-плиты, поэтапно:

  • сырье тщательно просушивается в сушильной установке, после чего пропитывается связующим составом;
  • древесные пряди распределяются по рабочей поверхности насыпью, а затем укладываются в так называемый ковер с помощью автоматической ориентирующей головки;
  • щепа и стружка, входящие в состав ОСП-плит, прессуются и соединяются в монолитную субстанцию с помощью смол, в состав которых входят карбамид, меламин, воск и другие нетоксичные безопасные компоненты;
  • с целью придания большей прочности и удобства в использовании изделия могут шлифоваться, ламинироваться или покрываться лаком;
  • на последнем этапе массив раскраивается, у готовых плит формируется кромка – либо ровная, либо по технологии «паз-гребень» — в зависимости от дальнейшего применения стружечной ОСП-плиты.

Разновидности плитных изделий из древесной стружки

Они могут различаться между собой по цвету, размеру, толщине, типу кромки, наличию либо отсутствию шлифовки, ламинирования, лакировки. Кроме того, OSВ классифицируют по влагостойкости и прочности. В этом разрезе их существует 4 разновидности:

Класс плиты Уровень влагостойкости Уровень прочности
OSB 1 низкий низкий
OSB 2 невысокий средний
OSB 3 высокий высокий
OSB 4 высокий очень высокий

Влагостойкие плиты предназначены для эксплуатации в условиях высокой либо переменной влажности как снаружи, так и внутри зданий и сооружений. Для всех остальных случаев вполне подходят разновидности с низкой влажностью.

Прочность же выбирается, исходя из планируемой нагрузки на конструкции из ОСБ-плит.

Области использования OSB

Благодаря прочности, экологической безупречности, ценовой доступности, удобству в работе и другим превосходным эксплуатационным характеристикам применение ОСП-плит охватывает разные сферы деятельности. В частности, в строительно-ремонтных работах их применяют для:

  • изготовления сэндвич-панелей, которые затем используются в малоэтажном строительстве;
  • обшивки снаружи и изнутри внешних стен;
  • отделки межкомнатных перегородок;
  • обустройства полов: с помощью этих плит можно делать как сплошной настил, так и лаги. А еще – использовать их для настилания чистового пола под отделку;
  • формирования основания под кровельный материал методом сплошной обрешетки стропильной системы. Здесь на первое место выступают высокие ветрозащитные свойства и небольшой вес изделий;
  • создания опорных поверхностей под облицовку керамической плиткой, искусственным бетонным камнем, клинкерным кирпичом;
  • строительства лестниц, временных площадок и подиумов;
  • конструирования опалубки под бетон. Опалубка из легких, ровных и гладких плит легко собирается и разбирается, к тому же, может использоваться многократно.

Есть и другие направления, где ОСП-плиты используются весьма успешно и эффективно, например:

  • конструирование надежных стеллажей, витрин, рекламных, информационных и выставочных стендов;
  • изготовление прочных поддонов, ящиков, контейнеров и другой упаковки малого веса, благодаря которому облегчается перемещение и подъем упакованных товаров и продукции;
  • настил полов в автофургонах, обустройство перегородок во времянках, например, на строительных площадках, внутренняя обшивка и зонирование железнодорожных вагонов и помещений морских и речных судов.
  • производство мебели: в корпусных изделиях из таких плит изготавливают полки, столешницы и даже фасады. В мягкой мебели они выступают в качестве элементов, увеличивающих ее прочность;

Если использовать конструкцию или изделие предполагается в условиях повышенной влажности, обосновано применение влагостойких ОСБ-плит третьего и четвертого классов. Это могут быть неотапливаемые технические помещения, объекты, строящиеся во влажном климате, ванные комнаты и санузлы, душевые, бани и сауны, бассейны и тому подобные.

Во всех остальных случаях при выборе стружечной плиты целесообразно ориентироваться, в первую очередь, на ее прочностные характеристики.

Так же рекомендуем короткое видео, где раскрывается тема:

0 0 голоса

Рейтинг статьи

Поделиться в социальных сетях:

Вас может заинтересовать:

Вирус оспы - обзор

Оспа

Вирус натуральной оспы стабилен и сохраняет свою инфекционность в течение длительного времени вне хозяина. 23 Вирус натуральной оспы заразен аэрозолем, 3 , но естественное воздушно-капельное распространение, за исключением тесных контактов, является необычным. 24,25 Примерно 30% восприимчивых контактов заразились в эпоху эндемической оспы, 26 и кампания ВОЗ по ликвидации была основана на требовании непосредственной близости от человека к человеку для надежной передачи.Тем не менее две больничные вспышки продемонстрировали, что вирус натуральной оспы может передаваться воздушно-капельным путем в условиях низкой относительной влажности. 27 Пациенты во время этих вспышек были заразными с момента появления высыпаний, чаще всего с 3-го по 6-й день после начала лихорадки. Если у пациента был кашель, шансы передачи инфекции значительно увеличивались. Непрямая передача через зараженную подстилку или другие фомиты наблюдалась нечасто. Некоторые люди, находящиеся в тесном контакте с пациентами, укрывают вирус в горле без развития болезни и, возможно, несут ответственность за вторичную передачу. 28

После контакта с вирусом в форме аэрозоля оспа перемещается из верхних или нижних дыхательных путей в региональные лимфатические узлы, где она воспроизводится и вызывает виремию, за которой следует сыпь. 29 Инкубационный период оспы в среднем составляет 12 дней (от 9 до 14 дней). Во время глобальной ликвидации всех, кто контактировал с инфицированными пациентами, помещали в карантин как минимум на 16-17 дней после заражения. Аналогичные рекомендации относятся к плану реагирования Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC) на повторное появление оспы (www.bt.cdc.gov/agent/smallpox/response-plan). После заражения респираторным путем и репликации в местных лимфатических узлах вирус натуральной оспы системно распространяется в другие лимфоидные ткани, селезенку, печень, костный мозг и легкие. В течение этого бессимптомного продромального периода вирус натуральной оспы может быть выделен из крови, но результат будет ниже, чем на более поздних стадиях болезни. Клинические проявления начинаются остро с недомогания, лихорадки, озноба, рвоты, головной боли и боли в спине; У 15% пациентов развивается делирий.Примерно у 10% светлокожих пациентов на этой стадии появляется эритематозная сыпь. Еще через 2–3 дня энантема появляется одновременно с дискретной сыпью на лице, руках и предплечьях. Из-за отсутствия кератинового слоя на слизистых оболочках поражения выделяют инфицированные эпителиальные клетки и вызывают инфекционные ротоглоточные выделения в первые несколько дней после высыпания, а иногда и за 24 часа до высыпания. 30 Эти респираторные выделения являются наиболее важным, но не единственным средством передачи вируса.После последующих высыпаний на нижних конечностях сыпь в течение следующей недели распространяется централизованно на туловище. Поражения быстро прогрессируют от пятен к папулам и, в конечном итоге, к пустулезным пузырькам ( Рис. 57.1 ). Поражения более многочисленны на конечностях и лице, и это центробежное распределение является важным диагностическим признаком. В отличие от поражений, наблюдаемых при ветряной оспе, очаги оспы на различных сегментах тела в целом остаются синхронными на стадии своего развития.Через 8–14 дней после начала пустулы образуют корки, которые при заживлении оставляют депрессивные депигментированные рубцы. Хотя титры вируса натуральной оспы в горле, конъюнктиве и моче со временем снижаются, вирус 2 можно легко выделить из корочек на протяжении всего периода выздоровления. 31 Следовательно, пациентов следует изолировать и считать заразными до тех пор, пока все струпья не отделятся.

Две различные формы оспы были признаны в прошлом веке появления натуральной оспы. Variola major, высоковирулентная, прототипическая и исторически значимая форма болезни, оставалась распространенной в Азии и некоторых частях Африки в течение двадцатого века.Variola minor отличался меньшей системной токсичностью и более мелкими поражениями при оспе. 29 Однако Диксон сообщил о многих случаях, неотличимых от вируса натуральной оспы, в своем обширном сравнении типов поражений. 32 Корте впервые описал малую натуральную оспу, первоначально в Африке, в 1904 году. Чапин обнаружил аналогичную легкую форму, известную как аластрим, которая возникла в Северной Америке еще в 1896 году и впоследствии была зарегистрирована в Южной Америке, Европе и Австралии. Два различных штамма вируса с пониженной вирулентностью вызывали малую оспу и аластрим, и оба обычно вызывали 1% смертности среди невакцинированных лиц. 11,29

В классификации Рао указаны пять клинических проявлений натуральной оспы. 33 Три четверти случаев оспы относились к классическому или обычному типу. После появления продромальной лихорадки и конституциональных симптомов у пациентов развивалась типичная сыпь натуральной оспы, центробежная по распределению, с синхронным прогрессированием от пятен к папулам, от пузырьков к пустулам, а затем к струпьям. Летальность составила 3% у вакцинированных пациентов и 30% у невакцинированных.Другие клинические проявления оспы встречались реже, вероятно, из-за различий в иммунном ответе хозяина. Оспа плоского типа, отмеченная у 2–5% больных оспой, характеризовалась как тяжелой системной токсичностью, так и медленным развитием плоских мягких очаговых поражений кожи, не похожих на классическую экзантему натуральной оспы. Этот синдром вызвал 66% смертности вакцинированных и 95% невакцинированных пациентов. Менее 3% больных оспой заболевали оспой геморрагического типа, которая сопровождалась обширными петехиями, кровоизлиянием в слизистые оболочки и сильной токсемией; смерть обычно наступала до того, как развились типичные очаги оспы. 34 Однако иногда геморрагическая оспа также возникала при классическом типе оспы на более позднем этапе болезни. Оспа как геморрагического, так и плоского типа могла указывать на основной иммунодефицит; геморрагические формы чаще встречались у беременных женщин и детей раннего возраста. 35 Модифицированный тип , , который обычно встречался, но не исключительно, у ранее вакцинированных лиц, характеризовался ослаблением конституциональных симптомов, обычно уменьшенным количеством поражений и быстрым развитием поражений с образованием корок к девятому дню болезни. . Variola sine eruptione характеризовалось продромальной лихорадкой и конституциональными симптомами. У этих пациентов, большинство из которых были вакцинированы, сыпь никогда не появлялась. 33 На самом деле проявления инфекции натуральной оспы распределяются по целому спектру, и классификация проводится в первую очередь с целью прогноза.

Бактериальная суперинфекция очагов оспы была относительно обычным явлением в до-антибиотическую эру, особенно в условиях отсутствия надлежащей гигиены и медицинской помощи и в тропической среде. 2 Артрит и остеомиелит развиваются на поздних стадиях болезни примерно у 1-2% пациентов, чаще возникают у детей и часто проявляются двусторонним поражением суставов, особенно локтей. 36 Тельца включения вируса могут быть обнаружены в суставном выпоте и костном мозге пораженной конечности. Иногда сообщалось о кашле и бронхите как о явных проявлениях оспы, что имеет значение для распространения инфекции; однако пневмония была необычной. 2 Отек легких часто возникал при геморрагической и плоской оспе. Орхит отмечен примерно у 0,1% пациентов. Энцефалит развился в 1 из 500 случаев оспы. Кератит и язвы роговицы были серьезными осложнениями оспы, прогрессирующими до слепоты чуть менее чем в 1% случаев. Заболевание во время беременности привело к высокой перинатальной смертности, также была выявлена ​​врожденная инфекция.

Частичный иммунитет, вызванный вакцинацией, привел к оспе модифицированного типа, при которой редкие кожные поражения развивались по-разному, часто без пустул и быстро, с образованием корок уже на седьмой день болезни.При контакте с оспой у некоторых полностью иммунных людей развилась лихорадка, боль в горле и конъюнктивит (так называемая контактная лихорадка), которые продолжались несколько дней, но не вызывали токсичности или незначительных повреждений кожи, которые указывают на вируса натуральной оспы . Лица, вылечившиеся от оспы, обладали длительным иммунитетом, хотя второй приступ мог случиться у 1 из 1000 человек после промежуточного периода в 15–20 лет. 36 Считается, что гуморальные и клеточные реакции являются важными компонентами выздоровления от инфекции.Пик нейтрализующих антител составляет 2–3 недели после начала заболевания, а у некоторых людей сохраняется более 5 лет, 37 до нескольких десятилетий. 15

Вирус натуральной оспы (натуральная оспа)


Если не указано иное, вся информация, представленная в этой статье, получена из следующих 2 источников:

  • Хендерсон Д.А., Борио Л., Грабенштейн Дж. Оспа и оспа обезьян. В Plotkin S и Orenstein W. (ред.), Vaccines . Филадельфия: W.B. Saunders Company; 2007.
  • Хендерсон Д.А., Инглсби ТВ, Бартлетт Дж. Г. и др. Для Рабочей группы по гражданской биозащите. Оспа как биологическое оружие: управление медициной и общественным здравоохранением. ЯМА . 1999; 281 (22): 2127-2137.

Фон

Оспа - очень заразная и смертельная болезнь, вызываемая вирусом натуральной оспы. По оценкам, в ХХ веке она заразила 300 миллионов человек, прежде чем стала единственной инфекционной болезнью человека, которую когда-либо удалось полностью искоренить.После глобальной кампании вакцинации, проводимой Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) (Интенсифицированная глобальная программа ликвидации), последний естественный случай оспы был в Эфиопии в 1977 году. Всемирная ассамблея здравоохранения объявила о ликвидации оспы в 1980 году и рекомендовала всем странам прекратить ее распространение. плановая вакцинация против оспы.

После искоренения оспы ВОЗ рекомендовала уничтожить все оставшиеся образцы натуральной оспы или отправить в 1 из 2 назначенных референс-лабораторий с высокой степенью сдерживания, расположенных в США.С. и Россия. Сегодня единственным потенциальным источником заражения оспой является непреднамеренный выброс в лаборатории или биологическая атака.

Оспа как биологическое оружие

Оспа считается одной из самых серьезных угроз биотерроризма. Он использовался в качестве биологического оружия во время французских и индейских войн (с 1754 по 1767 год), когда британские солдаты раздавали американским индейцам зараженные оспой одеяла. В 1980-х годах Советский Союз разработал натуральную оспу в качестве аэрозольного биологического оружия и ежегодно производил тонны зараженного вирусом материала, предназначенного для межконтинентальных баллистических ракет.

Несколько факторов способствуют беспокойству по поводу использования оспы в качестве биологического оружия:

  • Variola может передаваться от человека к человеку.

  • Нет широко доступного или лицензированного лечения этой болезни.

  • Имеет высокий уровень смертности.

  • Поскольку плановая иммунизация против оспы прекратилась в Соединенных Штатах в 1972 году, а во всех других странах к 1983 году, население мира чрезвычайно уязвимо для этой болезни.Большая часть населения мира никогда не была вакцинирована или вакцинировалась так давно, что иммунитет к оспе ослаб.

  • Variola относительно стабильна в виде аэрозоля.

  • Инфекционная доза мала.

Поскольку во время контакта симптомы отсутствуют, скрытое высвобождение вируса натуральной оспы не может быть обнаружено до тех пор, пока больные люди не начнут появляться в кабинетах врачей и больницах.(См. Короткий видеоролик CDC «История биотерроризма: оспа».)

Трансмиссия

Оспа передается от человека к человеку воздушно-капельным путем или при прямом контакте с биологическими жидкостями. Зараженная одежда или постельное белье также могут передавать вирус. Не известно, что животные и насекомые переносят или распространяют вирус среди людей. Инкубационный период оспы составляет от 7 до 17 дней.

Меры инфекционного контроля

Лица, у которых диагностирована или подозревается оспа, должны быть изолированы, чтобы предотвратить распространение болезни.Бытовые и другие лица, контактирующие с больными оспой или имеющими подозрение на нее, должны быть вакцинированы и находиться под наблюдением.

При обращении с больными оспой в больнице необходимо соблюдать меры предосторожности, связанные с воздушно-капельным путем (см. Рекомендации CDC по мерам предосторожности при изоляции), и весь персонал больницы должен быть вакцинирован.

Болезнь

Диагноз оспы основывается на клинических проявлениях у пациента и подтверждается лабораторными исследованиями.Симптомы чаще всего появляются через 12–14 дней после заражения и включают высокую температуру, тяжелое недомогание и истощение с головной болью и болью в спине.


Источник: Слайд ВОЗ по оспе в формате PDF

.

Сыпь в виде небольших розовых шишек появляется во рту, на лице и предплечьях, а затем распространяется на туловище и ноги, включая ладони и подошвы. В течение 1-2 дней сыпь сначала заполняется жидкостью, а затем гноем. Поражения округлые, твердые и глубокие; они начинают покрываться коркой на 8 или 9 день.Считается, что человек, инфицированный оспой, заразен с момента появления сыпи до момента ее заживления (~ 2 недели). Выжившие часто остаются обезображенными, с постоянными шрамами на лице.


Источник: CDC

Осложнения оспы включают бактериальные суперинфекции кожи и органов, пневмонию, сепсис, артрит, кератит и энцефалит. В отличие от натуральной оспы, ветряная оспа (болезнь, с которой ее, скорее всего, путают) связана с более легким продромальным заболеванием и более поверхностной сыпью, которая обычно начинается на туловище и распространяется центростремительно, имеет поражения на разных стадиях развития. , и редко появляется на ладонях или подошвах.

Оспа вызывается одним из двух близкородственных штаммов: большой и малой натуральной оспы. Два вируса невозможно различить, за исключением тестирования методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Инфекция Variola minor (известная как аластрим) вызывает меньше системных симптомов, менее обширную сыпь, меньше рубцов и меньше смертельных исходов.

В эпоху естественной оспы было выявлено несколько разновидностей основного заболевания натуральной оспы. См. Таблицу 1.

Таблица I: Классификация типов натуральной оспы ВОЗ,
на основе исследования 3544 пациентов в Индии, 1972 г. *
Тип оспы Характеристики Летальность
Обычное Наиболее распространенная форма; 90% случаев у непривитых 30%
Изменено Более легкая форма

Образует меньше, меньше и больше поверхностных повреждений

Невакцинированные в 2% случаев; 25% случаев у привитых

Случаи модифицированной оспы редко заканчивались смертельным исходом.
Злокачественная или плоская Поражения были более плоскими, развивались медленнее и сливались

7% случаев у невакцинированных лиц

97%
Геморрагический Трудно диагностировать; сыпь, сопровождающаяся кровотечением на слизистые оболочки и кожу

Менее 3% случаев

Около 100%
Variola sine eruptione (без сыпи) Встречается у ранее вакцинированных лиц, контактировавших с матерью, или у младенцев с материнскими антителами

У заболевших не было симптомов или кратковременная лихорадка, головная боль и гриппоподобные симптомы

Передача клинической оспы при вирусной сыпи натуральной оспы не была задокументирована

Не доступен; однако в случае малой натуральной оспы смерть наступала у <1% людей.

Получено из Fenner F, Henderson DA, Arita I, Ježek Z и Ladnyi ID. Оспа и ее искоренение . Женева: Всемирная организация здравоохранения; 1988. Стр. 4.

Лечение и профилактика

Постконтактная вакцинация в течение 1-3 дней после заражения вирусом натуральной оспы может предотвратить клинические проявления оспы. Вакцинация в течение 4-7 дней после контакта может снизить тяжесть заболевания.

В настоящее время не существует лицензированного противовирусного лечения натуральной оспы.Ингибитор протеазы SIGA-246 (SIGA Technologies, Inc.) получил статус орфанного препарата FDA в декабре 2006 года и в настоящее время проходит клинические испытания.

Антибиотики могут помочь в лечении вторичных бактериальных инфекций, а поддерживающая терапия также может принести пользу пациентам.

ACAM2000 (Sanofi) - лицензированная вакцина против оспы, которая в настоящее время находится в Национальном стратегическом запасе США (SNS). Эта вакцина содержит живой вирус осповакцины, родственника натуральной оспы. В редких случаях иммунизация вакциной против осповакцины может вызвать серьезные и потенциально опасные для жизни реакции.Из-за возможности этих реакций разрабатываются новые вакцины.

SNS содержит достаточно вакцины против оспы, чтобы иммунизировать каждого человека в США.

В настоящее время правительство США не рекомендует вакцинацию против оспы для населения. В декабре 2002 года президент объявил Программу вакцинации против оспы, цель которой состоит в добровольной вакцинации лиц, подвергающихся наибольшему риску в случае вспышки оспы, включая лиц, оказывающих первую помощь, и медицинских работников, входящих в состав «групп реагирования на оспу»."В целом, около 40 000 гражданских служащих были иммунизированы в первые несколько месяцев после объявления программы, но дальнейшие вакцинации в настоящее время не продвигаются. Развернутые военнослужащие продолжают вакцинироваться, а также лабораторный персонал, работающий с вакциной и родственными вирусами.

Поскольку натуральная оспа больше не возникает, единичный подтвержденный случай считается чрезвычайной ситуацией и требует выполнения федеральных и государственных планов реагирования на оспу по эпиднадзору и локализации.

См. Также

  • Веб-страница по оспе. Центры по контролю и профилактике заболеваний, готовности к чрезвычайным ситуациям и реагированию на них. https://www.cdc.gov/smallpox/index.html. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Веб-сайт Программы вакцинации против оспы Министерства обороны США. https://health.mil/smallpox?type=Policies. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Руководство по мерам предосторожности при изоляции: предотвращение передачи инфекционных агентов в медицинских учреждениях, 2007 г., веб-страница.Центры по контролю и профилактике заболеваний. https://www.cdc.gov/infectioncontrol/guidelines/isolation/index.html. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Хендерсон Д.А., Борио Л., Грабенштейн Дж. Оспа и оспа обезьян. В Plotkin S и Orenstein W. (ред.), Vaccines . Филадельфия: W.B. Компания Сондерс; 2007.
  • Хендерсон Д.А., Инглсби ТВ, Бартлетт Дж. Г. и др. Для Рабочей группы по гражданской биозащите. Оспа как биологическое оружие: управление медициной и общественным здравоохранением. ЯМА . 1999; 281 (22): 2127-2137. http://jama.ama-assn.org/cgi/content/full/281/22/2127. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Информационный бюллетень по оспе. Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний, Национальные институты здравоохранения. https://www.niaid.nih.gov/diseases-conditions/smallpox. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Visual Dx: оспа. http://www.logicalimages.com/resourcesBTAgentsSmallpox.htm. По состоянию на 26 февраля 2014 г.
  • Интернет-страница по оспе.Всемирная организация здоровья. http://www.who.int/topics/smallpox/en. По состоянию на 26 февраля 2014 г.

Последний раз отзыв 26 февраля 2014 г.

ACAM2000 (вакцина против оспы) Вопросы и ответы

Лицензированная FDA вакцина против оспы (оспы), живая, с патентованным названием ACAM2000, для активной иммунизации против оспы лиц, у которых определен высокий риск заражения оспой.Вакцина производится компанией Sanofi Pastuer Biologics Co. Одобрение и доступность этой противооспенной вакцины второго поколения в Стратегическом национальном запасе (СНС) повышает готовность Соединенных Штатов к чрезвычайным ситуациям против использования оспы в качестве опасного биологического оружия.



Вопросы о оспе и ACAM2000

Как работает ACAM2000?

Вакцина сделана на основе вируса коровьей оспы, который представляет собой вирус типа «оспы», связанный с оспой, но вызывающий более легкое заболевание.ACAM2000 не может вызвать оспу; он не содержит вируса оспы, а скорее «живого» вируса осповакцины, а не мертвого вируса, как многие другие вакцины. По этой причине важно внимательно следить за местом вакцинации, чтобы предотвратить распространение вируса из места вакцинации на другие части тела или на других людей.

ACAM2000 вводится иначе, чем обычный «укол», связанный с большинством прививок. Двустороннюю иглу из нержавеющей стали (или раздвоенную) погружают в раствор вакцины и несколько раз прокалывают кожу в области плеча каплей вакцины.Вирус начинает расти в месте инъекции, вызывая образование локализованной инфекции или «ямки». Красное зудящее болезненное пятно на месте вакцинации в течение 3-4 дней - показатель того, что вакцинация прошла успешно; то есть есть «дубль». На месте вакцинации образуется волдырь, который затем высыхает, образуя струп, который отпадает на третьей неделе, оставляя небольшой шрам. Вакцина стимулирует иммунную систему человека к выработке антител и клеток в крови и других местах, которые затем могут помочь организму бороться с настоящей инфекцией оспы, если заражение оспой когда-либо произойдет.

Что такое оспа?

Оспа - серьезное, очень заразное и часто смертельное инфекционное заболевание, вызываемое вирусом натуральной оспы, появившимся у людей тысячи лет назад. У человека, инфицированного оспой, на лице и теле появляется сыпь в виде выпуклых ямок. У человека, больного оспой, заразная слюна, и тесный контакт может распространить вирус. Вирус также может распространяться через другие биологические жидкости и зараженную одежду или постельное белье.

Разве не ликвидирована оспа?

После глобальной кампании по искоренению вируса, которая включала вакцинацию, Всемирная организация здравоохранения в 1980 году сертифицировала искоренение естественной оспы. До получения лицензии на ACAM2000 Dryvax, производимый Wyeth Laboratories, Inc., был единственной вакциной, лицензированной FDA. Плановая вакцинация населения США была прекращена в 1972 году после того, как болезнь была ликвидирована в Соединенных Штатах. Однако оспа может быть преднамеренно использована террористами в качестве оружия.Большая часть населения не имеет иммунитета, а уровень смертности может превысить 25%, если оспа будет использоваться в качестве биотеррористического оружия.

Отличается ли ACAM2000 от вакцины Dryvax, используемой для глобальной ликвидации оспы?

Обе вакцины получены из штамма осповакцины Департамента здравоохранения Нью-Йорка, но Dryvax выращивали на коже телят, а затем подвергали сушке вымораживанием для хранения. Он был лицензирован FDA в 1931 году, но больше не производится.ACAM2000, противооспенная вакцина «второго поколения», получена из клона Dryvax, очищена и произведена с использованием современной технологии культивирования клеток.

Насколько эффективен ACAM2000?

Клиническое исследование, демонстрирующее, что ACAM2000 не уступает Dryvax, было проведено в каждой из двух популяций: тех, кто никогда не вакцинировался от оспы (наивно), и тех, кто ранее вакцинировался. Для наивной популяции процент образования рубцов на участке кожи после вакцинации или «частота взятия» были аналогичны вакцинированным Dryvax.Для ранее вакцинированных иммунный ответ был приемлемым для ACAM2000.

В частности, клиническое исследование представляло собой многоцентровое рандомизированное контролируемое исследование, в котором сравнивали ACAM2000 и Dryvax. Чтобы сравнить эффективность у лиц, которые никогда ранее не вакцинировались против оспы (наивные), 780 субъектов получали ACAM2000 и 257 субъектов получали Dryvax. Получателями были мужчины и женщины в возрасте от 18 до 30 лет. В исследовании людей, ранее вакцинированных против оспы, 1242 человека получили ACAM2000, а 405 человек, включая мужчин и женщин в возрасте от 31 до 84 лет, получили Dryvax.Процент непривитых людей, у которых развилась успешная реакция иммунизации, был аналогичен показателю Dryvax. ACAM2000 также оказался приемлемым в качестве бустера для тех, кто ранее был вакцинирован от оспы.

Наверх


Вопросы о побочных эффектах и ​​о том, кого не следует вакцинировать

Есть ли какие-либо побочные эффекты, связанные с использованием ACAM2000?
Да, после вакцинации могут возникнуть осложнения со здоровьем, и необходимо сопоставить риск серьезных побочных эффектов с риском потенциально смертельной инфекции оспы.

Вакцина может вызывать миокардит и перикардит, которые представляют собой воспаление и отек сердца и окружающих тканей и могут быть очень серьезными. Согласно клиническим исследованиям, миокардит и / или перикардит встречается у 1 из 175 взрослых, которые получают вакцину впервые.

В ходе клинических испытаний ACAM2000 у семи человек из 2983 пациентов, впервые получавших ACAM2000, и трех человек из 868 пациентов, впервые получавших Dryvax, подозревали миокардит / перикардит.Заболеваний у тех субъектов, которые ранее были вакцинированы, не было.

Серьезные проблемы со здоровьем, в том числе опасные для жизни, также могут возникать у непривитых людей, случайно инфицированных кем-то, кто недавно получил вакцину. В частности, невакцинированные беременные, имеющие проблемы с сердцем или иммунной системой или кожные проблемы, такие как экзема, дерматит, псориаз, и находящиеся в тесном контакте с реципиентом вакцины, подвергаются повышенному риску серьезных проблем в случае заражения. с вакцинным вирусом либо в результате вакцинации, либо в тесном контакте с вакцинированным человеком.Для реципиента ACAM2000 очень важно правильно ухаживать за местом вакцинации, чтобы предотвратить распространение вируса вакцины и заражения другой части тела и других людей.

Эти типы серьезных побочных эффектов аналогичны тем, которые имели место в прошлом при применении других противооспенных вакцин.

Чаще наблюдаемые побочные эффекты включают: зуд, боль в руке, жар, головную боль, ломоту в теле, легкую сыпь и усталость.

Кого нельзя вакцинировать с помощью ACAM2000?

Медицинский работник может принять решение не назначать ACAM2000, если у человека ослаблена иммунная система (например,g., лейкоз, ВИЧ, СПИД, реципиенты трансплантата, люди с распространившимся раком и те, кто проходит лечение лекарствами, подавляющими иммунную систему, такими как стероиды, преднизон и противораковые препараты). Кроме того, медицинские работники могут принять решение не вакцинировать людей с кожными заболеваниями, такими как экзема, дерматит или псориаз, которые подвержены повышенному риску осложнений.

Как получатели ACAM2000 будут проинформированы о потенциальных рисках?

Каждый человек, который получает вакцину, должен получить Руководство по лекарствам, утвержденное FDA (21 CFR Part 208).Руководства по лекарствам - это распечатанные раздаточные материалы, которые относятся к конкретным медицинским продуктам и содержат утвержденную FDA информацию, которая может помочь пациентам избежать серьезных побочных эффектов. FDA требует, чтобы руководства по лекарствам были выпущены, когда агентство определяет, что:

  • определенная информация необходима для предотвращения серьезных нежелательных явлений
  • Пациент должен принимать решения на основе информации об известном серьезном побочном эффекте продукта, или
  • Соблюдение пациентом инструкций по использованию продукта имеет важное значение для его эффективности.

ACAM2000 - первая вакцина, лицензированная с Руководством по лекарствам. FDA определило, что руководство по лекарствам необходимо для безопасного и эффективного использования продукта, поскольку оно может помочь предотвратить серьезные побочные эффекты и проинформировать получателя о серьезных рисках, связанных с пользой, которые могут повлиять на их решение о вакцинации.

Будет ли ACAM2000 доступен всем желающим?

Нет, производитель заявил, что вакцина не будет доступна для населения в коммерческих целях, то есть ее нельзя получить в кабинете врача.Он был приобретен федеральным правительством для включения в Стратегический национальный запас страны для распределения Министерством здравоохранения и социальных служб в случае, если он когда-либо понадобится.

В настоящее время вакцину получают военнослужащие США. Кроме того, лабораторные исследователи, работающие с некоторыми вирусами оспы, также имеют право на вакцинацию.

Вакцина не рекомендуется для использования населением в целом, поскольку в мире нет оспы.

Наверх

Дизайн иммунного уклонения от вируса натуральной оспы: экспрессия высокоэффективного ингибитора человеческого комплемента

Реферат

Вирус натуральной оспы, наиболее опасный представитель рода Orthopoxvirus , специфически инфицирует людей и не имеет других животных-резервуаров. Оспа вызывает инфекционное заболевание - оспу, смертность от которой составляет 30–40%.И наоборот, прототип ортопоксвируса, коровьей оспы, не вызывает заболеваний у иммунокомпетентных людей и использовался для глобальной ликвидации оспы, которая закончилась в 1977 году. Однако угроза оспы сохраняется, поскольку все еще существуют подпольные запасы натуральной оспы. Хотя натуральная оспа и коровья оспа обладают замечательной гомологией ДНК, строгий тропизм натуральной оспы к человеку предполагает, что ее белки лучше, чем белки коровьей оспы, подходят для преодоления иммунного ответа человека. Здесь мы демонстрируем функциональное преимущество регуляторного белка комплемента натуральной оспы по сравнению с его гомологом осповакцины.Поскольку подлинные белки натуральной оспы недоступны для изучения, мы разработали и охарактеризовали с помощью молекулярной инженерии ингибитор ферментов комплемента оспы (SPICE), гомолог фактора вирулентности осповакцины, контрольный белок комплемента вируса осповакцины (VCP). SPICE почти в 100 раз более эффективен, чем VCP, при инактивации человеческого C3b и в 6 раз более эффективен при инактивации C4b. SPICE также более специфичен для человеческого комплемента, чем VCP. Инактивируя компоненты комплемента, SPICE служит для ингибирования образования конвертаз C3 / C5, необходимых для опосредованного комплементом выведения вируса.SPICE представляет первое доказательство того, что белки натуральной оспы особенно эффективны для преодоления иммунитета человека, а снижение функции VCP предполагает одну причину, по которой вакцина против вируса осповакцины была связана с относительно низкой смертностью. Отключение SPICE может быть терапевтически полезным при повторном появлении оспы.

Обеспокоенность общественного здравоохранения по поводу возможного повторного появления вируса натуральной оспы привела к возобновлению интереса к патогенезу натуральной оспы, а также к разработке методов лечения и более безопасных вакцин (1–3).На фундаментальном уровне строгий тропизм вируса натуральной оспы к человеку никогда не был объяснен (4, 5). За исключением исследований сходства ДНК между белками натуральной оспы и другими членами семейства ортопоксвирусов (6–8), существуют минимальные данные об аутентичных белках натуральной оспы (5). In vivo модели с участием ортопоксвирусов ограничены в первую очередь вирусами осповакцины, коровьей оспы и эктромелии, которые не вызывают заболевания у иммунокомпетентных людей (2, 9–11). Чтобы проверить гипотезу о том, что натуральная оспа особенно подходит для инфицирования людей, отчасти из-за способности избегать комплемент-зависимой инактивации вируса, мы охарактеризовали ортопоксвирусные регуляторные белки комплемента (СРБ) натуральной оспы и коровьей оспы и сравнили их эффективность в борьбе с вирусом. активация комплемента.

Тяжесть ортопоксвирусных инфекций зависит от множества факторов, включая как иммунный ответ хозяина, так и вирусные механизмы, которые действуют, чтобы подорвать его (6, 10). Врожденный иммунный ответ включает систему комплемента, которая уничтожает микробные патогены, включая вирусы и инфицированные вирусом клетки (12). Исследование роли комплемента хозяина в патогенезе ортопоксвируса показало, что мыши с дефицитом компонента комплемента C5 (необходимого для завершения пути комплемента) имели неконтролируемый воспалительный ответ с выраженными изъязвлениями и повреждением тканей при заражении коровьей оспой в подушечках ног (11).Напротив, мыши с достаточным количеством комплемента имели более слабую и быстро разрешающуюся реакцию на инъекции коровьей оспы без разрушения тканей. Различия между двумя группами мышей наблюдались только при первом контакте с вирусом, и никаких повреждений не наблюдалось, когда мышей повторно заражали коровьей оспой после полного исчезновения начальных поражений, что позволяет предположить, что адаптивные иммунные ответы были достаточными для нейтрализации. вирус при повторном заражении, и этот комплемент имел решающее значение для первоначального иммунного ответа.

Вирусы кодируют белки специально для преодоления комплемента хозяина (12). Наши исследования касаются CRP, кодируемых в терминальных областях ортопоксвирусов, где кодируются белки, важные для иммунной модуляции и вирулентности (4, 7, 13, 14). Некоторые кодируемые вирусами CRP сходны по структуре и функциям с CRP млекопитающих (15). В нормальных условиях CRP млекопитающих сохраняют целостность клеток-хозяев-свидетелей перед лицом активации комплемента. Однако кодируемые вирусами CRP, по-видимому, предотвращают разрушение комплемента инфицированных клеток-хозяев, чтобы обеспечить более эффективное распространение вируса (15, 16).Поскольку ядросодержащие клетки млекопитающих способны «образовывать пузырьки» на участках мембраны, поврежденной комплементом, именно скорость активации комплемента определяет судьбу клетки (16). Напротив, эффективность вирусных CRP может определять, уничтожается ли инфицированная клетка или остается местом репликации вируса. СРБ

различаются по лигандной специфичности и механизму инактивации конвертазы (17). CRP могут ускорять нормальный распад конвертаз или действовать в качестве кофакторов сериновой протеазы, фактора I, для ферментативного расщепления α'-цепей C3b и C4b на более мелкие, неактивные фрагменты (17).Степень инактивации α'-цепи различается для каждого кофактора и частично зависит от концентрации кофактора и ионной силы. Структурно CRPs состоят из 4-56 гомологичных мотивов, называемых короткими консенсусными повторами (SCR) (17). Каждый SCR имеет длину примерно 60 аминокислот и четыре инвариантных цистеина, связанных дисульфидной связью. Рецептор комплемента человека типа 1 (CR1; CD35), например, имеет 30 SCR и представляет собой наиболее мощный CRP млекопитающих, обладающий как ускоряющим распад, так и кофакторной активностью (18–20).

Белок контроля комплемента (VCP) вируса осповакцины секретируется клетками, инфицированными коровьей оспой (21, 22), и функционирует в основном как кофактор для фактора I сериновой протеазы, а не как ускоритель распада (23-25). Делеция VCP не влияет на рост коровьей оспы in vitro (21, 23). Однако экспрессия VCP in vivo увеличивает вирулентность вируса у кроликов и морских свинок и вызывает более крупные поражения при внутрикожном введении (26). Естественный хозяин осповакцины неизвестен, но он широко изучен на лабораторных животных.

Сравнительные исследования ДНК показывают, что геномы всех штаммов натуральной оспы кодируют CRP, состоящий из четырех SCR (14), который мы назвали ингибитором оспы ферментов комплемента (SPICE). Variola, штамм Bangladesh (5, 8) кодирует SPICE в концевой области D15L. SPICE отличается от аминокислотной последовательности VCP на 4,6% (рис. 1 A ). Различные штаммы натуральной оспы, секвенированные на сегодняшний день, включая Индию-1967, Сомали-1977, Конго-1970 и Гарсия-1966, каждый кодируют последовательность белка SPICE, которая отличается на 0.4% от такового бангладешского штамма (14). Недавно описанная кристаллическая структура VCP (27) обеспечивает платформу для описания сходства и различия аминокислот между VCP и SPICE. Структура VCP показывает протяженную молекулу с дискретными SCR. Различия в 11 аминокислот между VCP и SPICE рассредоточены по SCR 2, 3 и 4. Если предположить, что платформа VCP применима для SPICE, кластеризации аминокислотных различий не происходит (рис. 1 B ).

Рисунок 1

Последовательности SPICE и VCP; идентификация rSPICE, rVCP, VCP дикого типа.( A ) Выровненные аминокислотные последовательности SPICE и VCP, стрелки указывают на различия в остатках. Консервативные цистеины, которые определяют укладку SCR, схематично связаны, и последняя аминокислота каждой SCR пронумерована. ( B ) Спереди и сзади схематические изображения SPICE, отображенные на структуру VCP, визуализированные RASMOL V.2.7.2.1. Аминокислотные различия розовые в SCR2, оранжевые в SCR3 и зеленые в SCR4. ( C ) SDS / PAGE, окрашенный Кумасси для SPICEhis, VCPhis, SPICEFc и VCPFc.( D ) Вестерн-блоттинг VCPhis, SPICEhis и VCP дикого типа. Белки идентифицировали с использованием поликлональной антисыворотки против VCP / SPICE. VCP дикого типа и VCPhis мигрируют одинаково примерно на 35 кДа.

В отсутствие белков натуральной оспы дикого типа мы описываем молекулярную инженерию, экспрессию и характеристику SPICE. Наши исследования демонстрируют, что, несмотря на замечательную идентичность последовательностей между SPICE и VCP, SPICE обладает функциональным преимуществом, специфичностью человеческого комплемента и активностью кофактора, больше похожей на человеческие CRP, чем на VCP.Эти данные дают представление о патогенезе и видовой специфичности натуральной оспы.

Методы

Молекулярная инженерия, экспрессия и очистка рекомбинантного SPICE.

SPICE был получен путем мутации аминокислотной последовательности VCP в последовательность SPICE. Тринадцать нуклеотидных мутаций привели к заменам 11 аминокислот (рис. 1 A ). Двадцать два праймера (Life Technologies, Grand Island, NY) были сконструированы со следующими точечными мутациями: T был заменен на A в положении 339 последовательности ДНК VCP (22), T на C400, A на C416, A на G430, A для G466, T для C500, G для C501, A для G538, T для G540, A для G640, T для C686, C для A749 и C для A814.Последовательность ДНК подтверждали секвенатором 377 Stretch (Applied Biosystems). SPICE был заменен на VCP в трех плазмидах [ pRelVCP1234 , pApHygVCPFc и pVCPFc (28)], ранее используемых для экспрессии VCPFc в клетках 293T. Рекомбинантные бакуловирусы были созданы путем субклонирования фрагментов SPICEFc и VCPFc Eco RI / Xba I в pFastBacHTa (система Bac-to-Bac, Life Technologies) с целью создания pFastBacHTaSPICEFc и bacFastcBac SPICEFc и VCPFc .

Бакуловирусная конструкция, содержащая лидерную последовательность плацентарной щелочной фосфатазы (29) и шесть гистидинов на карбоксильном конце, была создана с использованием подхода, основанного на ПЦР. Использовали олигонуклеотиды 99AMR1 (5'-GCACCCGGGAGTTCTATCATGCTGTACTATTCCG-3 ') и HISSTOP (5'-GCTCTAGACTCGAGCTAGTGGTGGTGGTGGTGGTGGCGTACACATTTTGGAAGTTC-3'). Фрагменты SPICE и VCP Psp A1 / Xho I были лигированы в фагмиду pBluescript II KS (Stratagene) и впоследствии субклонированы в сайты pFastBac по адресу Xba I / Xho I для создания pFBSPICEhis. и pFBVCPhis .Одновременно лидер щелочной фосфатазы из pPbac (Stratagene) был отщеплен с использованием Nhe I / Psp AI и лигирован для генерации pFBapSPICEhis и pFBapVCPhis , которые были использованы для создания бакуловируса, содержащего SPICE и SPICE. VCPhis .

Рекомбинантные белки были продуцированы в клетках 293T (28) или в Spodoptera frugiperda (клетки Sf9) (Life Technologies) и очищены сродством из культурального супернатанта с помощью гранул белка A CL-4B (Amersham Pharmacia) или Ni-NTA Superflow (Qiagen, Валенсия, Калифорния).Рекомбинантные белки диализовали против PBS (Life Technologies). SPICEhis и VCPhis были охарактеризованы электрофорезом на SDS / 12% полиакриламидном геле и масс-спектрометрией (M-Scan, West Chester, PA).

Производство антисыворотки против VCP и против SPICE для идентификации rVCP, rSPICE и VCP дикого типа.

Антисыворотку против VCP

получали стандартными методами (30). Мышей BALB / c в возрасте от четырех до шести недель (The Jackson Laboratory) иммунизировали внутрибрюшинно. с 35 мкг rVCP в полном адъюванте Фрейнда, а затем с бустером 35 мкг белка в неполном адъюванте Фрейнда.Среда из клеток BS-C-1 (CCL-26, Американская коллекция типовых культур), предварительно инфицированных 10 бляшкообразующими единицами на клетку штамма осповакцины Western Reserve (предоставлена ​​Дж. Бойером, Университет Пенсильвании), была сконцентрирована 100 -складывают, фракционируют с помощью SDS / PAGE и переносят на нитроцеллюлозную мембрану. VCP дикого типа идентифицировали с помощью вестерн-блоттинга с антисывороткой против VCP (разведение 1: 1000).

Деградация C3b или C4b в присутствии SPICE и фактора I.

Активность кофактора

измеряли путем инкубации C3b или C4b с каждым кофактором при 37 ° C. Образцы удаляли через 0, 4 и 24 часа, как указано. Девять микрограммов C3b или C4b (Advanced Research Technologies, Сан-Диего) инкубировали с 3 мкг фактора I (Advanced Research Technologies) и 6 мкг VCPhis, SPICEhis, фактора H (Advanced Research Technologies) или растворимого CR1 (sCR1) (предоставляется от Novartis Pharmaceutical, Ганновер, Нью-Джерси) в общем объеме 33 мкл при 37 ° C, как описано (25).Десять микролитров удаляли через 0, 4 и 24 часа, смешивали с буфером для образцов, содержащим 2-меркаптоэтанол (Bio-Rad), кипятили 2 минуты и подвергали электрофорезу на SDS-9% полиакриламидном геле. Продукты расщепления C3b и C4b визуализировали путем окрашивания геля кумасси синим. Фрагменты расщепления C3bα 'мигрируют следующим образом: 68 кДа, 46 кДа (iC3b 1 ), 43 кДа (iC3b 2 ) и <35 кДа (C3dg / C3c). Фрагменты расщепления C4bα 'мигрируют следующим образом: 64 кДа (iC4b), 46 кДа (C4d) и 25 кДа (C4c).

Скорость кофакторной активности SPICEhis, VCPhis и sCR1.

Кинетические эксперименты проводили путем инкубации C3b или C4b с фактором I (13 мкМ) и 0,65 пМ SPICEhis, VCPhis или sCR1 в общем объеме 66 мкл при 37 ° C. Образцы (10 мкл) отбирали в указанные сроки и подвергали электрофорезу. Гели, окрашенные кумасси, сканировали для денситометрического анализа с помощью пропускающего спектрофотометра (модель 355A, Molecular Dynamics) и анализировали с использованием imagequant 3.2 (Молекулярная динамика). Сообщенные значения представляют собой оптическую плотность (OD) относительно исходного образца цепей C3bα 'или C4bα'. Эксперименты проводились пять раз.

Ингибирование комплемент-опосредованного гемолиза эритроцитов овец и кроликов.

Комплемент-опосредованный гемолиз оценивали путем определения максимального разведения сывороток человека, собаки, морской свинки и павиана (данные не показаны), которое привело к 100% гемолизу сенсибилизированных антителами эритроцитов барана (EA) или несенсибилизированных эритроцитов кролика (Er). (1 × 10 8 на мл GVB ++ ) (передовые исследовательские технологии) (31) при 37 ° C.После этого сыворотки серийно разводили в полипропиленовых 96-луночных планшетах с U-образным дном (Corning) до тех пор, пока не перестанет быть обнаружен гемолиз. Реакции останавливали через 1 час с помощью PBS (180 мкл на лунку). Максимальный гемолиз был достигнут при добавлении воды вместо PBS. Супернатант (100 мкл) считывали при 405 нм. Сыворотка нагревается до 56 ° С в течение 30 мин. Установлен фоновый гемолиз.

Чтобы определить влияние различных CRP на комплемент-опосредованный гемолиз EA или Er, добавляли 25 мкл серийно разведенной сыворотки, а затем 25 мкл 0.1–0,25 мг / мл CRP или PBS и 50 мкл эритроцитов (1 × 10 8 на мл в GVB ++ ). Реакции инкубировали при 37 ° C и останавливали через 1 час добавлением PBS, как описано выше. Представленные значения представляют собой процент максимального гемолиза для лунок, обработанных CRP, по сравнению с лунками, обработанными PBS, при идентичных разведениях сыворотки. Все эксперименты проводились от трех до десяти раз, и во всех случаях были получены воспроизводимые результаты.

Результаты

Молекулярная инженерия, экспрессия и очистка рекомбинантного SPICE.

Ни вирус натуральной оспы, ни природные белки натуральной оспы, ни геномная ДНК натуральной оспы не доступны для широкого научного сообщества. Таким образом, мы сгенерировали кодирующую последовательность SPICE из последовательности VCP путем сайт-направленного мутагенеза 13 нуклеотидов VCP , что привело к заменам 11 аминокислот (рис. 1 A ), что соответствует предсказанной аминокислотной последовательности. СПЕЦИИ. Чтобы облегчить очистку рекомбинантных белков SPICE и VCP, мы разработали по две конструкции для каждой.Одна конструкция кодирует карбоксиконцевую гистидиновую метку (his), а другая кодирует карбоксиконцевую Fc-область мышиного IgG2a (Fc).

Рекомбинантные белки SPICE (rSPICE) и VCP (rVCP) были продуцированы в клетках млекопитающих и насекомых и подвергнуты аффинной очистке. SPICEhis, VCPhis, SPICEFc и VCPFc мигрировали в виде отдельных полос в восстанавливающих условиях на 12% SDS / PAGE при 33, 35, 53 и 55 кДа соответственно (фиг. 1 C ). В условиях невосстановления, слитые с Fc белки мигрировали со скоростью примерно 110 кДа, представляя димеры из-за дисульфидных связей между двумя доменами Fc (32).Рекомбинантные белки, продуцируемые в клетках млекопитающих и насекомых, функционировали одинаково и одинаково мигрировали при SDS / PAGE (данные не показаны).

Ожидаемые молекулярные массы 28 936 и 28 818 Да для SPICEhis и VCPhis, соответственно, были подтверждены масс-спектрометрией, хотя миграция на SDS / PAGE была немного медленнее, чем ожидалось. VCP дикого типа, секретируемый в среду клеток, инфицированных осповакциной, и рекомбинантный VCP были идентифицированы с помощью вестерн-блоттинга (фиг. 1 D ).Как VCP дикого типа, так и VCPhis мигрировали при приблизительно 35 кДа, что согласуется с опубликованной массой VCP дикого типа (23).

Активность кофактора фактора I SPICE.

Молекулярная инженерия и экспрессия SPICE подтвердили, что натуральная оспа продуцирует компактный, функционально активный кофактор фактора I. Эксперименты по деградации C3b, проведенные, как описано (25, 33), сравнивали активность кофактора SPICE, VCP, растворимого человеческого CR1 (sCR1) (33). ) и множитель H (рис.2 A ) при нормальной ионной силе. Растворимый CR1 - это рекомбинантный растворимый белок, состоящий из 30 SCR мембраносвязанного CR1, но без его трансмембранного и цитоплазматического доменов (33). Кофакторная активность SPICE была устойчивой, с немедленным расщеплением C3b на iC3b 2 с последующим расщеплением на C3c / C3dg (образцы взяты через 4 и 24 часа). В присутствии VCP, C3b деградировал медленнее, сначала до iC3b 1 , а затем до iC3b 2 . Однако VCP не участвовал в дальнейшей деградации iC3b 2 даже через 24 часа.Следовательно, качественно SPICE больше похож на фактор H, который служит кофактором фактора I в деградации iC3b 2 до C3c / C3dg после более длительных инкубаций (34) (рис. 2 B ). Хотя SPICE не так силен, как sCR1, он может привести к аналогичному паттерну деградации (33). Для C4b мы провели идентичные эксперименты, заменив C4b на C3b (рис. 2 C ). SPICEhis и VCPhis, по-видимому, функционируют идентично и приводят к деградации C4b до C4c / C4d (Fig. 3 D ).Фактор H также служит кофактором деградации фактора I C4b в жидкой фазе (35).

Рисунок 2

Деградация C3b и C4b в присутствии SPICEhis и VCPhis. ( A ) Появление продуктов расщепления C3b в присутствии фактора I и фактора H, VCPhis, SPICEhis, sCR1 или PBS через 0, 4 и 24 часа. ( B ) Схема разложения C3b в присутствии фактора I (45) и кофакторов, VCP или SPICE. ( C ) Появление продуктов расщепления C4b в присутствии фактора I и фактора H, VCPhis, SPICEhis, sCR1 или PBS через 0, 4 и 24 часа.( D ) Схема разложения C4b (46) в присутствии фактора I и кофакторов, VCP или SPICE.

Рисунок 3

Динамика деградации C3b с помощью SPICEhis, VCPhis и sCR1. ( A ) Окрашенный Кумасси SDS / PAGE продуктов разложения C3b из реакций, содержащих C3b, фактор I и либо SPICEhis, VCPhis, либо sCR1. Образцы реакции удаляли через 0, 5, 15, 30, 60 и 120 мин. ( B ) Скорость разложения C3bα '. Гели сканировали для денситометрического анализа с использованием пропускающего спектрофотометра, и OD полосы C3bα 'в каждый момент времени сравнивали с OD исходного образца C3bα'.График зависимости процента деградации от времени. Эксперименты проводились пять раз, и планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение. ( C ) Скорость деградации цепи C3bα 'и образование других продуктов расщепления C3b в присутствии SPICEhis представлены как процент от исходной цепи C3bα'. Анализ был выполнен, как описано в B . ( D ) Скорость деградации C3b и образование продуктов расщепления C3b в присутствии VCPhis нанесены на график как процент от исходной цепи C3bα '.Анализ был выполнен, как описано в B .

Кинетические эксперименты были выполнены для сравнения скорости кофакторной активности при предельных концентрациях рекомбинантных кофакторов (фиг. 3 A ). Используя в 100 раз более низкие концентрации (0,68 пМ) рекомбинантных кофакторов, чем те, которые использовались в предыдущем эксперименте (рис. 2 A ), можно было установить различия в активности. В присутствии SPICEhis 50% цепи C3bα 'деградировало за ≈3 мин (рис.3 A и B ), и полностью деградировал на 15 мин. Растворимый CR1 приводил к почти полной деградации цепи C3bα 'за 7 мин. Однако только 20% цепи C3bα 'разрушилось через 120 минут с помощью VCP. Следовательно, SPICEhis действует как кофактор фактора I в деградации C3b с почти в 100 раз большей эффективностью, чем VCPhis. Растворимый CR1 функционирует как минимум в два раза быстрее, чем SPICEhis. Все эксперименты проводились не менее пяти раз, и во всех случаях были получены воспроизводимые результаты.Кроме того, паттерны деградации показали, что с SPICEhis цепь C3bα 'сразу же расщеплялась до iC3b 1 с последующим расщеплением до iC3b 2 (рис. 3 C ), тогда как с VCPhis такой деградации до iC3b не было. 2 (рис. 3 D ), что согласуется с Sahu et al. (25).

Аналогичным образом были выполнены кинетические эксперименты с использованием C4b (рис. 4 A ). При предельных концентрациях рекомбинантных белков (0.68 пМ), 50% цепи C4bα 'деградировало за 5 минут с sCR1 (фиг. 4 B ), 20 минут с SPICEhis и 120 минут с VCPhis. Следовательно, SPICEhis функционирует примерно в 6 раз быстрее, чем VCPhis, но медленнее, чем sCR1. Минимальное улучшение активности кофакторов SPICEhis и VCPhis для C3b и C4b наблюдалось в растворе с половинной ионной силой (данные не показаны).

Рисунок 4

Динамика деградации C4b с помощью SPICEhis, VCPhis и sCR1. ( A ) Окрашенный Кумасси SDS / PAGE продуктов разложения C4b из реакций, содержащих C4b, фактор I и либо SPICEhis, VCPhis, либо sCR1.Образцы реакции удаляли через 0, 30, 60, 120, 180 и 240 минут для SPICEhis и VCPhis и через 0, 5, 15, 30, 60 и 120 минут для sCR1. ( B ) Скорость разложения C4bα '. Гели сканировали для денситометрического анализа с использованием пропускающего спектрофотометра, и OD полосы C4bα 'в каждый момент времени сравнивали с OD исходного образца C4bα'. График зависимости процента деградации от времени. Эксперименты проводились пять раз, и планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение. ( C ) Скорость деградации цепи C4bα 'и образование продуктов расщепления C4b в присутствии SPICEhis представлены как процент от исходной цепи C4bα'.Анализ был выполнен, как описано в B . ( D ) Скорость деградации C4b и образование продуктов расщепления C4b в присутствии VCPhis нанесены на график как процент от исходной цепи C4bα '. Анализ был выполнен, как описано в B .

Видовые предпочтения SPICE.

Поскольку CRP млекопитающих проявляют гомологичную рестрикцию, то есть они лучше всего действуют против комплемента из филогенетически родственных видов (36), мы спросили, может ли натуральная оспа проявлять «ограничение комплемента хозяина», особенно из-за ее строгого диапазона хозяев.Мы сравнили способность rSPICE и rVCP ингибировать комплемент у человека, собаки, морской свинки (рис. 5 A - D ) и павиана (данные не показаны) в гемолитических анализах. EA лизируются в присутствии увеличивающегося количества комплемента из-за активации классического пути, тогда как Er чувствительны к альтернативному пути. Анализ данных показывает, что и rVCP, и rSPICE ингибируют оба пути комплемента. Однако rSPICE предпочтительно ингибирует комплемент человека и павиана, тогда как rVCP предпочтительно ингибирует комплемент собаки и морской свинки.Конструкции Fc вели себя менее эффективно, чем конструкции, меченные His, возможно, из-за димеризации домена Fc, который мог влиять на функцию. Исследования гемолиза показывают, что предпочтение SPICE человеческому комплементу аналогично предпочтению натуральной оспы человеку-хозяину.

Рисунок 5

Ингибирование комплемента из разных видов вирусными CRP. ( A ) Влияние вирусных CRP на опосредованный классическим путем гемолиз EA в присутствии человеческого комплемента.EA инкубировали с сывороткой человека в присутствии ингибитора (черные квадраты) или в эквимолярных количествах SPICEhis (красные ромбы) и VCPhis (зеленые кружки) или SPICEFc (синие треугольники) и VCPFc (квадраты, разделенные на четыре части) в течение 1 часа при 37 ° C. ° C. Сообщаемые значения представляют собой степень гемолиза относительно максимального гемолиза, как определено добавлением воды к EA. Результаты представляют десять отдельных экспериментов. ( B ) Влияние вирусных CRP на опосредованный классическим путем гемолиз EA в присутствии комплемента собаки.Эксперименты проводили, как описано выше, за исключением того, что в качестве источника комплемента использовали собачью сыворотку. Результаты представляют шесть отдельных экспериментов. ( C ) Влияние вирусных CRP на опосредованный альтернативным путем гемолиз Er в присутствии человеческого комплемента. Результаты представляют четыре отдельных эксперимента. ( D ) Влияние вирусных CRP на опосредованный альтернативным путем гемолиз Er в присутствии комплемента морской свинки. Результаты представляют три отдельных эксперимента.

Обсуждение

Хотя вирулентность ортопоксвирусов представляет собой совокупное действие всех их белков, ни в одном исследовании не сравнивалась функция каких-либо гомологов оспы и оспы. Мы сравнили растворимые вирусные регуляторные белки комплемента, SPICE и VCP, и продемонстрировали, что SPICE является более мощным ингибитором человеческого комплемента и что это открытие нельзя было предсказать только с помощью анализа ДНК. Эффективность SPICE была почти в 100 раз выше, чем у VCP.Хотя sCR1 функционирует лучше, чем SPICE, его лучшая функция может быть объяснена тремя лиганд-связывающими сайтами CR1 (37-40). Поскольку SPICE эффективно предотвращает стабильность человеческих C3b и C4b, он по существу инактивирует конвертазы и, следовательно, как классический, так и альтернативный пути комплемента. Следовательно, продукция медиаторов воспаления C3a, C4a и C5a также снижается. Следовательно, целью SPICE может быть создание микросреды вокруг клеток, инфицированных натуральной оспой, для защиты их от опосредованной комплементом атаки, в то время как они служат местом репликации вируса.

SPICE и VCP демонстрируют предпочтение комплемента из разных видов в гемолитических экспериментах. Тот факт, что SPICE лучше действует против человеческого комплемента количественно и качественно, демонстрирует, что натуральная оспа проявляет предпочтение человека на уровне белка, концепция ранее предлагалась, но не показывалась. Тот факт, что VCP относительно плохо действует при инактивации C3b и C4b человека, указывает на одну причину его относительной безопасности и эффективности в качестве противооспенной вакцины.

Единственный другой поксвирус, который специфически вызывает заболевание человека, - это вирус контагиозного моллюска, который приводит к образованию доброкачественных узелков на коже, которые спонтанно регрессируют. Анализ геномной последовательности показывает, что, несмотря на заметное сходство последовательностей между геномами вируса контагиозного моллюска, коровьей оспы и оспы, у вируса контагиозного моллюска отсутствуют гомологичные последовательности с известными белками осповакцины, которые модулируют иммунный ответ хозяина (41). В список из примерно 20 отсутствующих белков включен гомолог VCP или SPICE.Возможно, что отсутствие CRP может способствовать доброкачественной картине заболевания вирусом контагиозного моллюска.

Минимальные аминокислотные различия между VCP и SPICE позволяют предположить, что несколько остатков имеют решающее значение для функции CRP. Несколько областей, которые идентичны между VCP и SPICE, коррелируют с областями, которые ранее были показаны как важные в CRP млекопитающих, мембранном кофакторном белке (MCP; CD46). МСР действует как кофактор фактора I, инактивируя как C3b, так и C4b (27, 42).Область 191–196 MCP важна для связывания C3b и коррелирует с областями 184–189 VCP и SPICE (Fig. 1 A ). Кроме того, сравнение последовательностей VCP и MCP предполагает, что Phe-201 и Arg-203 в VCP, оба присутствующие в SPICE, важны во взаимодействиях C3b.

Расширенная функция SPICE предполагает, что одно или несколько из 11 различий между SPICE и VCP могут иметь решающее значение для определения функционального преимущества SPICE. Замена Lys-120 на Glu-120 в SCR2 коррелирует с идентичной заменой, сделанной в SCR2 CR1 (STEPPIC на STKPPIC), что привело к усилению связывания C3b и активности кофактора (38, 40).Более того, Liszewski et al. продемонстрировал, что последовательность NEGYYLIGEE (области 94-103) MCP представляет как сайт активности связывания / кофактора C4b, так и сайт активности кофактора C3b (42). Практически идентичная последовательность находится в областях 94–103 SPICE и VCP, хотя большая идентичность последовательности наблюдается в SPICE, который содержит два последовательных Tyr (положения 97 и 98) по сравнению с одним Tyr в VCP в положении 97. Поскольку Ala для Tyr- Замена 98 в MCP аннулировала активность кофактора C4b (42), Tyr-98 в SPICE может играть важную роль в активности кофактора C4b.Кроме того, Murthy et al. предположил, что Asn-94, Ser-95, His-98, Glu-102 и Ser-103 в VCP экспонируются на поверхности и, следовательно, имеют структурное значение в межмолекулярных взаимодействиях (27), но еще большая идентичность последовательностей наблюдается в этот регион между SPICE и MCP. Значение различных аминокислотных остатков между VCP и SPICE будет в центре внимания будущих исследований мутагенеза. Ранее охарактеризованную кристаллическую структуру SCR1 и 2 MCP нельзя было сравнивать, поскольку эта часть MCP содержит сайт связывания кори, а не сайт связывания лиганда комплемента (43).

В будущих исследованиях будет важно изучить CRP других ортопоксвирусов, таких как коровья оспа. Однако CRP коровьей оспы имеет относительно большие делеции в SCR1 и вдвое большее количество аминокислотных различий, чем между VCP и SPICE (44), что может ограничивать выводы о значимости конкретных аминокислот для функции CRP.

Глобальное искоренение оспы стало крупным медицинским триумфом. Однако, поскольку вирус натуральной оспы все еще существует, его потенциальное использование в биотеррористической атаке может привести к вспышкам оспы во всем мире, поскольку большая часть населения не вакцинирована против оспы.Фактически, только 20% ранее вакцинированных лиц все еще защищены из-за ослабления иммунитета (3). Угроза оспы должна послужить толчком для разработки эффективных методов лечения этого заболевания. Кроме того, для иммунизации населения необходима более безопасная вакцина. Когда вакцина использовалась ранее, вакцина, доступная в настоящее время, была связана со значительными осложнениями, особенно у пациентов с подавленным иммунитетом (3). Лучшее понимание патогенеза натуральной оспы необходимо для достижения целей разработки как лечения оспы, так и более безопасной вакцины.

Проблемы этики и общественного здравоохранения препятствуют работе in vivo над натуральной оспой, а Всемирная организация здравоохранения запрещает исследования рекомбинации ДНК между геномами натуральной оспы и других ортопоксвирусов. Таким образом, изучение натуральной оспы сопряжено с множеством препятствий. Хотя in vivo и исследований ортопоксвирусов, у которых отсутствует тропизм человека, могут указывать на факторы вирулентности, важные для натуральной оспы, относительно доброкачественная природа многих ортопоксвирусов для человека может недооценивать важность любых гомологичных белков при натуральной оспе.Только интеграция исследований in vitro, белков натуральной оспы и исследований in vivo, других ортопоксвирусов может предложить план терапевтического вмешательства при оспе. Поскольку оспа была ликвидирована до того, как стали широко доступны методы манипуляции с ДНК, доступно очень мало молекулярных исследований этого вируса.

В этом исследовании мы демонстрируем подход к молекулярной инженерии белков натуральной оспы, которые необходимы для понимания патогенеза натуральной оспы.Мы предоставляем in vitro доказательств того, что SPICE является высокоспецифичным и мощным ингибитором человеческого комплемента, частично объясняющим видовую специфичность и патогенез натуральной оспы. Предполагая, что комплемент так же важен для сдерживания ортопоксвируса у людей, как и у грызунов, SPICE, по-видимому, является фактором вирулентности для вируса натуральной оспы. Таким образом, отключение SPICE может представлять собой подход к лечению оспы. Кроме того, отключение VCP может представлять собой подход к разработке более безопасной противооспенной вакцины.

Благодарности

Мы благодарны докторам. Стивену Экку, Джозефу Ахерну, Деннису Хуркейду и Джонни Муру за бесценные обсуждения, а также Джереми Риду за рецензирование рукописи. Спасибо д-ру Жану Бойеру за предоставленную среду из клеток, инфицированных коровьей оспой, и д-ру. Ричард Харрисон, Томаш Саблински и Манфред Шульц из Novartis Pharmaceutical для sCR1 (TP-10). Эта работа была частично поддержана грантом HLB31331 Национального института здравоохранения.

Сноски

  • ↵ * Кому следует обращаться с запросами на перепечатку.Электронная почта: arosenga {at} mail.med.upenn.edu.

  • См. Комментарий на стр. 8461.

Сокращения

C3b,
протеолитически расщепленная форма C3;
C3bα ',
α-цепь C3b;
iC3b 1 ,
инактивированная форма C3b, возникающая в результате расщепления фактора I α-цепи;
iC3b 2 ,
инактивированная форма C3b, возникающая в результате расщепления α-цепи вторым фактором I;
C4b,
протеолитически расщепленная форма C4;
C4bα ',
α-цепь C4b;
CR1,
рецептор комплемента типа 1 (CD35);
CRP,
регуляторный белок комплемента;
EA,
сенсибилизированные антителами эритроциты барана;
Er,
несенсибилизированные эритроциты кролика;
MCP,
белок мембранного кофактора (CD46);
SCR,
короткий консенсусный повтор;
sCR1,
растворимый CR1;
SPICE,
ингибитор оспы ферментов комплемента;
VCP,
контрольный белок комплемента вируса осповакцины;
Fc,
Карбоксиконцевой домен Fc мышиного IgG2a
  • Получено 8 марта 2002 г.
  • Принята 11 апреля 2002 г.
  • Copyright © 2002, Национальная академия наук

Вакцина против оспы - что вам нужно знать

Вакцина против оспы помогает организму развить иммунитет к оспе. Вакцина сделана из вируса коровьей оспы, который представляет собой вирус типа «оспы», связанный с оспой. Вакцина против оспы содержит «живой» вирус осповакцины, а не мертвый вирус, как многие другие вакцины. По этой причине необходимо тщательно ухаживать за местом вакцинации, чтобы предотвратить распространение вируса.Также вакцина может иметь побочные эффекты.

Вакцина не содержит вируса оспы и не может заразить вас оспой.

В настоящее время в Соединенных Штатах имеется достаточно большой запас противооспенной вакцины, чтобы вакцинировать всех, кому она может понадобиться в случае возникновения чрезвычайной ситуации. Продолжается производство новой вакцины. Однако в настоящее время вакцинируются только назначенные «первые респонденты». Все эти люди вызвались получить вакцину.

Степень защиты

Вакцинация против оспы обеспечивает полный иммунитет на 3-5 лет и в дальнейшем снижает иммунитет.Если позже сделать повторную вакцинацию, иммунитет сохраняется еще дольше. Исторически вакцина была эффективной для предотвращения заражения оспой у 95% вакцинированных. Кроме того, было доказано, что вакцина предотвращает или существенно снижает инфекцию при введении в течение нескольких дней после заражения. Однако важно отметить, что в то время, когда противооспенная вакцина использовалась для искоренения болезни, тестирование не было таким продвинутым и точным, как сегодня, поэтому, возможно, еще есть что узнать о вакцине, ее эффективности и длина защиты.

Получение вакцины

Вакцина против оспы не вводится с помощью иглы для подкожных инъекций. Это не выстрел, как многие испытали. Вакцина вводится с помощью разветвленной (двусторонней) иглы, которую погружают в раствор вакцины. При удалении игла удерживает каплю вакцины.

Игла используется для 15 уколов кожи за несколько секунд. Укол неглубокий, но при этом образуется болезненное место и образуется одна или две капли крови. Вакцинация обычно вводится в плечо.

Если вакцинация прошла успешно, через три или четыре дня на месте вакцинации образуется красная и зудящая шишка. В первую неделю шишка превращается в большой волдырь, заполняется гноем и начинает стекать.

На второй неделе волдырь начинает подсыхать и образуется струп. Струп отпадает на третьей неделе, оставляя небольшой шрам. Люди, которым вакцинируются впервые, имеют более сильную реакцию, чем те, кто проходит повторную вакцинацию.

Уход после вакцинации

После введения вакцины очень важно следовать инструкциям по уходу за участком вакцины.(См. Информационный бюллетень «Уход за местом проведения вакцинации против оспы»). Поскольку вирус является живым, он может распространяться на другие части вашего тела или даже на других людей. Вирус осповакцины (живой вирус в вакцине против оспы) может вызывать сыпь, жар, головные боли и боли в теле. У определенных групп людей осложнения от вируса коровьей оспы могут быть серьезными.

Безопасность противооспенной вакцины

Вакцина против оспы - лучшая защита, которую вы можете получить от вируса оспы.Любому, кто напрямую заразился оспой, независимо от состояния здоровья, будет предложена вакцина против оспы, потому что риски, связанные с оспой, намного выше, чем риски, связанные с вакциной.

Несмотря на то, что с 1978 года в мире не было случаев оспы, из-за возможности использования натуральной оспы в биотерроризме людям, которые могут отреагировать на случай заражения оспой, предлагается возможность пройти вакцинацию.

Вакцинация будет проводиться поэтапно, при этом в первую очередь будут вакцинированы бригады общественного здравоохранения и больниц.

Противооспенная вакцина вызывает побочные эффекты и риски. Большинство людей испытывают нормальные, обычно легкие реакции, которые включают боль в руке, жар и боли в теле. Однако другие люди испытывают реакции от серьезных до опасных для жизни. Наиболее вероятно, что у людей будут серьезные побочные эффекты: люди, у которых хотя бы однажды были кожные заболевания (особенно экзема или атопический дерматит), и люди с ослабленной иммунной системой, например, те, кто получил трансплантат, являются ВИЧ-положительными, получают лечение. от рака или в настоящее время принимаете лекарства (например, стероиды), подавляющие иммунную систему.

Кроме того, беременным женщинам не следует делать вакцину из-за риска, который она представляет для плода. Женщины, кормящие грудью, не должны получать вакцину. Людям младше 18 лет и лицам, страдающим аллергией на вакцину или любой из ее компонентов, вакцину не следует вводить.

Тщательный мониторинг вакцинации против оспы, проведенной в последние месяцы, показал, что вакцина могла вызвать побочные эффекты на сердце. Были сообщения о боли в сердце (стенокардия), воспалении сердца (миокардит), воспалении оболочки, покрывающей оболочку сердца (перикардит), и / или о сочетании этих двух проблем (миоперикардит).Эксперты исследуют это более подробно. В качестве меры предосторожности, если врач поставил вам диагноз сердечного заболевания с симптомами или без них, вам НЕ следует делать прививку от оспы в это время. К ним относятся такие состояния, как известная ишемическая болезнь сердца и / или три или более из следующих факторов риска:

  • Врач сообщил вам, что у вас высокое кровяное давление.
  • Врач сообщил вам, что у вас повышенный уровень холестерина в крови.
  • Врач сообщил вам, что у вас диабет или повышенный уровень сахара в крови.
  • У вас есть близкий родственник (мать, отец, брат или сестра), у которого было сердечное заболевание до 50 лет.
  • Вы курите сигареты сейчас.

В прошлом около 1000 человек на каждый миллион человек, вакцинированных впервые, испытывали серьезные реакции, хотя и не опасные для жизни. Эти реакции включали токсическую или аллергическую реакцию в месте вакцинации (мультиформная эритема), распространение вируса коровьей оспы на другие части тела и других людей (непреднамеренная прививка) и распространение вируса коровьей оспы на другие части тела. организм через кровь (генерализованная вакцинация).Эти типы реакций могут потребовать медицинской помощи. В прошлом от 14 до 52 человек из каждого миллиона человек, вакцинированных впервые, испытывали потенциально опасные для жизни реакции на вакцину. Основываясь на прошлом опыте, считается, что 1-2 человека из 1 миллиона, получивших вакцину, могут в результате умереть. Тщательный скрининг потенциальных реципиентов вакцины имеет важное значение, чтобы гарантировать, что люди из группы повышенного риска не получат вакцину.

Научный метод в истории вакцины

Что такое научный метод?

Научный метод - это дисциплинированный, систематический способ задавать вопросы о физическом мире и отвечать на них.Хотя может быть полезно думать о научном методе как о простой серии шагов, на самом деле не существует единой модели научного метода, которая могла бы применяться во всех ситуациях. Скорее, разные научные исследования требуют разных научных методов. Однако определенные качества должны относиться ко всем приложениям научного метода.

Одним из важных качеств научного исследования является то, что оно должно пытаться ответить на вопрос. Другими словами, расследование не должно пытаться «доказать» точку зрения, а должно быть попыткой получить знания.Другое качество состоит в том, что тщательные контролируемые наблюдения должны лечь в основу сбора информации. Наконец, результаты научного исследования должны быть воспроизводимыми: другие исследователи, использующие тот же процесс, должны иметь возможность наблюдать те же результаты. Если результат не воспроизводится, первоначальные выводы следует подвергнуть сомнению.

Шаги научного метода

То, что мы сегодня называем «ступенями» науки, со временем развивалось, и они могут отличаться в зависимости от типа проводимого исследования.Однако, как правило, эти шаги включают в себя наблюдение, формирование гипотезы (упомянутый выше «вопрос»), проведение теста и заключение.

Наблюдение

Научные исследования обычно начинаются с наблюдения, которое указывает на интересный вопрос. Один известный пример наблюдения, который привел к дальнейшим исследованиям, был сделан шотландским биологом Александром Флемингом в 1920-х годах. После отсутствия в своей лаборатории он вернулся и начал чистить несколько стеклянных пластин, на которых он выращивал определенный вид бактерий.Он заметил странную вещь: одна из пластин была загрязнена плесенью. Любопытно, что область вокруг плесени выглядела свободной от роста бактерий. Его наблюдение показало, что может существовать причинно-следственная связь: плесень или вещество, производимое плесенью, может предотвратить рост бактерий. Наблюдение Флеминга привело к серии научных тестов, которые привели к новым знаниям: пенициллин можно использовать для лечения бактериальных инфекций.

Гипотеза

Гипотеза - это предложение или возможное решение, полученное путем наблюдения.В исследовании Александра Флеминга антибиотических свойств плесени его гипотеза могла быть примерно такой: «Если фильтраты определенного типа плесени ввести в бактерии, бактерии погибнут».

Хорошие гипотезы имеют несколько общих качеств. Во-первых, они обычно начинают с уже имеющихся знаний. То есть они не предлагают идей, которые сильно расходятся с нашими общими знаниями о том, как устроен мир. Кроме того, хорошие гипотезы просты и включают единственную проблему и возможное решение.Наконец, хорошие гипотезы можно проверить и «опровергнуть». То есть предлагаемое решение в гипотезе может быть подвергнуто наблюдаемой проверке, и с помощью этой проверки исследователь может доказать ложность гипотезы. Вышеупомянутая гипотеза, касающаяся исследований Флеминга плесени, опровергнута, потому что тест, в котором бактерии росли в присутствии фильтрата плесени, опровергал бы эту гипотезу, если бы она не была правдой.

Тестирование

Многие современные научные исследования включают тест с контрольной и экспериментальной группами.Другие виды исследований можно проводить с помощью моделирования или исследований и анализа данных. Но в этой статье мы обсуждаем экспериментальное тестирование.

Исследователь проводит эксперимент на контрольной группе так же, как и на экспериментальной группе. Единственное отличие состоит в том, что исследователь не подвергает контрольную группу воздействию единственного тестируемого фактора или вмешательства. Этот единственный проверяемый фактор известен как переменная. Контрольная группа существует, чтобы обеспечить достоверное сравнение с экспериментальной группой.

Например, в эксперименте по проверке гипотезы Флеминга ученый мог ввести фильтраты плесени в культуры бактерий на стеклянных пластинах. Это будет экспериментальная группа. Контрольная группа будет содержать аналогичные культуры бактерий, но без добавления фильтрата плесени. В противном случае обе группы будут подчиняться точно таким же условиям. Любое различие между двумя группами может быть результатом переменной или единственной разницы между ними: внесение фильтрата плесени в бактериальные культуры.

Тщательные наблюдения и регистрация данных имеют решающее значение на этапе тестирования научного метода. Отсутствие точного измерения, наблюдения и записи может исказить результаты теста.

Заключение

Последний этап научных методов включает анализ и интерпретацию данных, собранных на этапе тестирования. Это позволяет исследователю сделать вывод на основании полученных данных. Хороший вывод учитывает все собранные данные и отразится на гипотезе, независимо от того, поддерживает ли она гипотезу или нет.

Теперь мы рассмотрим различные аспекты научного метода, используемого различными новаторами при разработке вакцин.

Эдвард Дженнер: важность наблюдения

Эдвард Дженнер, родился в Англии в 1749 году, является одним из самых известных врачей в истории медицины. Дженнер проверил гипотезу о том, что заражение коровьей оспой может защитить человека от заражения оспой. Все вакцины, разработанные со времен Дженнера, являются результатом его работы.

Коровья оспа - необычное заболевание крупного рогатого скота, обычно легкое, которое может передаваться от коровы человеку через язвы на коровьем вымени.Оспа же, напротив, была смертельной болезнью для людей. Он убил около 30% зараженных. У выживших часто были глубокие ямки на лицах и других частях тела, пораженных болезнью. Оспа была основной причиной слепоты.

Говорят, что Дженнер интересовалась наблюдением доярки. Она сказала ему: «У меня никогда не будет оспы, потому что у меня была коровья оспа. У меня никогда не будет уродливого рябого лица ». И многие другие работники молочной фермы обычно считали, что заражение коровьей оспой защищает их от оспы.

Учитывая, что защитный эффект заражения коровьей оспой был общеизвестен на местном уровне, почему участие Дженнер было важным? Дженнер решил систематически проверить это наблюдение, которое затем станет основой практического применения преимуществ инфекции коровьей оспы.

Дженнер нацарапал какой-то материал из язвы коровьей оспы на руке доярки в руку восьмилетнего Джеймса Фиппса, сына садовника Дженнера. Молодой Фиппс несколько дней чувствовал себя плохо, но полностью выздоровел.

Вскоре Дженнер поцарапал что-то из свежей человеческой язвы от оспы на руке Фиппса, пытаясь заразить его оспой. Однако Фиппс не заболел оспой. Дженнер проверил свою идею на других людях и опубликовал отчет о своих открытиях.

Теперь мы знаем, что вирус, вызывающий коровью оспу, принадлежит к семейству вирусов Orthopox. К вирусам ортопоксии относятся также вирусы натуральной оспы, вызывающие оспу.

Метод вакцинации Дженнер от оспы стал популярным и со временем распространился по всему миру.Примерно через 150 лет после смерти Дженнера в 1823 году оспа будет давать последний вздох. Всемирная организация здравоохранения в конце концов заявила, что оспа на планете полностью ликвидирована в 1980 году после масштабной программы эпиднадзора и вакцинации.

Объяснение научного метода Дженнера показано ниже:

  • Наблюдение: Люди, переболевшие коровьей оспой, не заболевают оспой.
  • Гипотеза: Если человек был намеренно заражен коровьей оспой, то он будет защищен от заболевания после целенаправленного заражения оспой.
  • Тест: Заразить человека коровьей оспой. Тогда попробуйте заразить человека оспой. (Обратите внимание, что Дженнер не использовал контрольную группу в своем эксперименте.)
  • Заключение: Заражение человека коровьей оспой защищает от заражения оспой.

Дженнер повторил свой эксперимент несколько раз и получил те же результаты. Другие ученые поступили так же и получили те же результаты. Дженнер известен тем, что применил научный метод к разработке средств профилактики оспы.

Роберт Кох: шаги по определению причины заболевания

Роберт Кох (1843-1910) был немецким врачом, который помог установить бактериологию как науку. Кох сделал важные открытия в идентификации бактерий, вызывающих сибирскую язву, холеру и туберкулез, в то время, когда понимание микробов только зарождалось.

Кох и его коллега Фридрих Лёффлер разработали метод выявления возбудителя болезни. Сегодня ученые следуют этим основным принципам, которые мы теперь называем постулатами Коха, пытаясь определить причину инфекционного заболевания.Постулаты Коха основаны на тщательных наблюдениях и воспроизводимости.

  1. Микроб присутствует в каждом случае заболевания.
  2. Микроб можно взять от хозяина и выращивать самостоятельно.
  3. Заболевание может быть вызвано введением чистой культуры микроба здоровому экспериментальному хозяину. *
  4. Микроб можно выделить и идентифицировать от хозяина, инфицированного на этапе 3.

* Единственным исключением из шага 3 является то, что некоторые люди могут быть инфицированы болезнетворным микробом и не проявлять признаков болезни.Они известны как бессимптомные носители.

Перл Кендрик: тщательное управление

В 1930-е годы Перл Кендрик из Министерства здравоохранения Мичигана разработала вакцину от коклюша, которая, как она надеялась, окажется более эффективной, чем предыдущие вакцины. Важная часть демонстрации эффективности вакцины включала контрольную группу детей, которые не получали вакцину. В то время это было чем-то вроде новшества, но Кендрик знала, что наличие контрольной группы добавит веса ее выводам, если вакцина окажется эффективной.Уровень заболеваемости коклюшем в контрольной группе позволил Кендрик легко продемонстрировать, может ли ее вакцина снизить уровень заболеваемости в экспериментальной группе.

Кендрик отнесла детей к своей экспериментальной группе по коклюшу, если они приходили в клинику для вакцинации от коклюша. Для контрольной группы она произвольно находила детей из списка неиммунизированных детей, который ведется городским отделом здравоохранения. Одна из ошибок, которую мы увидим сегодня в плане эксперимента Кендрика, заключалась в отсутствии рандомизации при отнесении детей к экспериментальной или контрольной группе.Рандомизация - это метод использования одного только случая для отнесения субъектов к контрольной или экспериментальной группе. Исследователи используют рандомизацию, потому что это помогает гарантировать, что различия между двумя группами не повлияют на результат эксперимента. Если бы у Кендрик были рандомизированные распределения, она бы минимизировала различия между вакцинированной группой и группой, которую она просто наблюдала.

Несмотря на этот недостаток, исследование Кендрик помогло установить нормы и ожидания в отношении будущих испытаний вакцины и ясно продемонстрировало эффективность ее вакцины.

Джонас Солк: двойное слепое рандомизированное исследование

Полевые испытания инактивированной полиовирусной вакцины (ИПВ) Джонаса Солка в 1954 году стали еще одной важной вехой в использовании научного метода для тестирования вакцины. В этом испытании было задействовано огромное количество субъектов - всего 1,3 миллиона детей - в самом крупном медицинском полевом испытании, которое когда-либо проводилось.

Испытание Солка было тщательно разработанным двойным слепым рандомизированным экспериментом . Это означало, во-первых, что детей случайным образом распределяли либо в контрольную, либо в экспериментальную группу.«Двойной слепой» означает, что никто - ни ребенок, ни родитель, ни человек, сделавший инъекцию, ни лицо, оценившее состояние здоровья ребенка, - не знают, получил ли конкретный ребенок вакцину от полиомиелита или инъекцию плацебо. (Плацебо - это неактивное вещество. В данном случае плацебо представляло собой раствор соленой воды.) Информация о том, получил ли ребенок вакцину или плацебо, была закодирована цифрами на флаконах, из которых был взят введенный материал, и была связана к записи ребенка.Только после того, как период наблюдения закончился и результат был записан - заболел ли ребенок полиомиелитом во время периода наблюдения или нет? - обнаруживался экспериментальный или контрольный статус ребенка.

Власти не достигли двойного слепого рандомизированного стандарта на протяжении всего испытания вакцины против полиомиелита. В некоторых общинах официальные лица возражали против использования инъекций плацебо, поэтому дети в контрольной группе просто наблюдались на предмет признаков полиомиелита. Эти группы были известны как наблюдаемые контрольные.Некоторые разработчики исследования беспокоились, что различия между наблюдаемой контрольной и экспериментальной группами могут повлиять на результат. Например, наблюдаемая контрольная группа включала детей, родители которых не соглашались на вакцинацию. Были ли существенные различия, такие как доход, жилье или возраст родителей, между детьми, родители которых не соглашались, и теми, кто соглашался? И могут ли эти различия повлиять на то, подверглись ли дети уже заражению полиомиелитом и стали ли они невосприимчивыми к нему?

Испытания вакцины Солка успешно показали, что вакцина помогла предотвратить паралитический полиомиелит, и вскоре последовало лицензирование вакцины.Болезнь, которая когда-то парализовала тысячи детей, теперь ликвидирована в Западном полушарии.

Заключение

История научного метода исследования вакцин привела к тому, что сегодня процесс разработки вакцины тщательно регулируется. С годами стандарты для исследований вакцин становились все более строгими, чтобы контрольные группы и группы вакцины были максимально похожи друг на друга. Принципы контроля, ослепления и рандомизации играют ключевую роль при тестировании вакцин.Для получения дополнительной информации см. Статью «Разработка, тестирование и регулирование вакцин».

Источники

Программа открытых коллекций библиотеки Гарвардского университета. Инфекция: исторические взгляды на болезни и эпидемии. Дата обращения 17.01.2018.

Кендрик П., Элдеринг Г. Исследование активной иммунизации против коклюша. Американский журнал гигиены 29: 133-153.

Marks, H.M. Полевые испытания вакцины Солка от полиомиелита в 1954 году. Клинические испытания .2011 Апрель; 8 (2): 224-34. Дата обращения 17.01.2018.

Marks, H.M. Полевые испытания коклюшной вакцины Кендрика-Элдеринга (Фрост). Библиотека Джеймса Линда. 2006. Дата обращения 17.01.2018.

Ошинский, Д. Полиомиелит: американская история. Нью-Йорк: Oxford University Press, 2005.

Сэр Александр Флеминг: вопросы и ответы. Nobelprize.org. Дата обращения 17.01.2018.

Чтобы читать PDF-файлы, загрузите и установите Adobe Reader .

Последнее обновление 17.01.2018

1 Оспа и борьба с оспой в историческом контексте | Программа вакцинации от оспы: общественное здравоохранение в эпоху терроризма


Хаммарлунд Э, Льюис М., Хансен С., Стрелов Л., Нельсон Дж., Секстон Дж., Ханифин Дж., Слифка М.2003. Продолжительность противовирусного иммунитета после вакцинации против оспы. Nature Medicine 9 (9): 1131-1137.

Хендерсон Д. 1988. Оспа и оспа. В: Плоткин С.А., Мортимер Е.А., ред. Вакцины . Филадельфия: WB Saunders Company, Harcourt Brace Jovanovich, Inc., стр. 8-30.

Henderson DA, Inglesby TV, Bartlett JG, Ascher MS, Eitzen E, Jahrling PB, Hauer J, Layton M, McDade J, Osterholm MT, O'Toole T, Parker G, Perl T, Russell PK, Tonat K, для Рабочая группа по гражданской биозащите.1999. Оспа как биологическое оружие: управление медициной и общественным здравоохранением. Журнал Американской медицинской ассоциации 281 (22): 2127-2137.


IOM (Институт медицины). 1999. Оценка будущих научных потребностей в живом вирусе натуральной оспы. Вашингтон, округ Колумбия: Национальная академия прессы.


Lane J, Goldstein J. 2003. Оценка рисков вакцинации против оспы в 21 веке и варианты политики. Анналы внутренней медицины 138 (6): 488-493.

Люк С. 2002, 29 марта. Производитель лекарств обнаружил на складе миллионы доз противооспенной вакцины. Уолл Стрит Джорнэл .


NIH (Национальные институты здравоохранения). 2002, март. Пресс-релиз: Результаты исследования NIAID поддерживают сокращение запасов противооспенной вакцины для увеличения поставок. [Онлайн] Доступно по адресу http://www2.niaid.nih.gov/newsroom/releases/smallpox.htm. По состоянию на 30 января 2005 г.


PRNewswire. 2002, 26 апреля. Компания DynCorp начинает фазу I клинических испытаний противооспенной вакцины.[Онлайн] Доступно по адресу http://www.prnewswire.com/gh/cnoc/comp/260725. По состоянию на 3 января 2005 г.


Радецкий М. 1999. Оспа: история возникновения и падения. Журнал детских инфекционных болезней 18 (2): 85-93.

Роос Р. 2002, 28 марта. В запасе Авентис хранится до 90 миллионов доз противооспенной вакцины. Новости CIDRAP .

Роос Р. 2003, 21 августа. Д.А. Критические анализы Хендерсона сообщают о продолжительности иммунитета против оспы. Новости CIDRAP .


Talbot T, Stapleton J, Bready R, Winokur P, Bernstein D, Germanson T, Yoder S, Rock M, Crowe J, Edwards K. 2004. Показатель успешности вакцинации и профиль реакции разбавленной и неразбавленной противооспенной вакциной: рандомизированное контролируемое испытание . Журнал Американской медицинской ассоциации 292 (10): 1205-1212.


Белый дом. 2002. Президент делает замечания по оспе. [Онлайн] Доступно по адресу http://www.whitehouse.gov/news/releases/2002/12/20021213-7.html. По состоянию на 8 января 2003 г.

ВОЗ (Всемирная организация здравоохранения). 2001. Информационный бюллетень ВОЗ по оспе. [Онлайн] Доступно по адресу http://www.who.int/emc/diseases/smallpox/factsheet.html. По состоянию на 23 июля 2004 г.

ВОЗ. 2002. Ликвидация оспы: уничтожение запасов вируса натуральной оспы. 111-я сессия Исполнительного совета, пункт 5.3 предварительной повестки дня. Документ ВОЗ EB111 / 5.

ВОЗ. 2003. Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы: отчет о пятом совещании. Женева: Всемирная организация здравоохранения.